动物造模,IBD 中国实验动物信息网 2022-02-02 657

　　自1960年代以来，化学诱导方法就很早就开始了，并已成为制备IBD模型的*成熟和*常用的方法。有许多类型的化学兴奋剂，例如乙酸，葡聚糖硫酸钠，过氧亚硝酸钠和角叉菜胶。化学刺激建模类别中经常包含2,4-二硝基氯苯（DNCB），2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS），2,4-二硝基苯磺酸盐（DNBS）等。因此，需要澄清这个概念。化学刺激的机制是化学物质直接刺激肠粘膜，从而导致细胞损伤，血管通透性增加和某些炎症因子的激活。在此过程中，不可避免地会产生免疫反应。但是，该反应过程与肠道免疫反应性肠炎本质上不同（见下文）。当DNCB，TNBS等直接作用于肠（或与乙醇，乙酸等结合）而没有致敏作用时，特别是当单次使用后肠炎发展时，可以将其视为化学刺激模型。

　　1、乙酸模型

　　[模型化机理]乙酸直接刺激肠粘膜，引起上皮坏死和血管损伤，并增强血管通透性。乙酸激活奎宁，促进纤维蛋白水解，防止凝结并激活环氧化。酶和脂氧合酶途径引起炎症。 [建模方法] Wistar大鼠用乙醚轻轻麻醉，将一根外径为2 mm的聚乙烯导管插入距肛门8 cm的结肠中，缓慢注入2 ml的3％乙酸，并在10秒内完成注入。然后用5毫升盐水冲洗2、然后，低着头躺在地上，双脚抬起30秒钟，以防止液体从大肠流出。 5天后，动物将出现腹泻，便血，体重减轻，粘膜出血，上皮坏死，粘膜下水肿，中性粒细胞浸润等。炎症可扩展至固有层，粘膜下层甚至肌层。  [模型特征]是暂时的非特异性粘膜损伤和急性炎症。强大的自我修复能力。它的炎症介质与人类急性肠炎相似。缺点是它不能准确反映人UC的免疫学变化，不能显示人UC的慢性和复发性。

　　[模型评估和应用]该模型简单，易于实现，成本低，周期短，可重复性好，成功率高。它适用于研究人类UC的急性期，炎性介质引起的炎症机制以及药物治疗的机制，但不适用于免疫机制的研究。成功引入模型的关键是乙酸的作用浓度和作用持续时间，它适合引起弥漫性，无穿孔的炎症。

　　2、葡聚糖硫酸钠模型 [建模机理]葡聚糖硫酸钠（DSS）是一种由蔗糖合成的硫酸化多糖，具有与肝素相同的止血和抗凝作用。 DSS诱导的溃疡性结肠炎的机制可能与其对DNA合成，上皮细胞增殖的抑制以及肠粘膜屏障破坏（肠道菌群进入粘膜固有层）有关。引起迁移并导致巨噬细胞和Th1/Th2/Th17细胞功能的过度激活，与残疾有关。

　　[建模方法] BALB/c小鼠，雄性和雌性，8-9周，16-18 g，5％DSS，蒸馏水。方案1：小鼠自由摄取5％DSS，共7天，然后换成蒸馏水10天，以释放它们，形成一个急性UC模型的循环。方案2：根据方案1、小鼠完成4个周期，并转化为慢性UC模型。在*个周期（急性期）或第四个周期（慢性期）结束后7天处死动物。结果，在开始建模后4至5天，在急性期小鼠中出现腹泻，并且潜血测试为阳性。该病从肛门传播到口腔，其中直肠*严重。病变部位的粘膜充血和水肿，糜烂和溃疡散在。粘膜和粘膜下层主要浸润中性粒细胞。在慢性小鼠中，不仅在急性期同时出现腹泻和血便，而且在停药DSS，结肠肉芽组织生长，粘膜结构丧失和腺体丧失后5至6天仍见血便和腹泻。还发现了畸形，萎缩和肠道缩短。粘膜和粘膜下层主要浸润淋巴细胞，浆细胞和巨噬细胞。  [模型特征]在慢性期和慢性疾病的急性发作中，它与人IBD的临床特征更加一致。它可用于研究人IBD在急性和缓解期的病理特征。结肠粘膜病变主要在左侧，可导致结肠上皮萎缩和发育异常，从而增加患癌的风险。这类似于人类UC会变成癌的方式。

　　[模型评估和应用] IBD是在动物自由喝DSS时发生的，并且在建立模型时将人为因素的干扰降至*低。该方法简单，易于实施，可重复，周期长和短，适用于UC的急性期和缓解期。精确控制动物消耗的DSS量将进一步减少模型病变之间的差异。该模型通常用于筛选UC相关结直肠癌的预防和治疗药物。