动物实验,单纯疱疹病毒 中国实验动物信息网 2020-08-27 738

　　目的：构建包含针对水泡谷氨酰胺转运蛋白3（Vglut3）的特定RNA干扰序列的单纯疱疹病毒1型载体，并观察其减轻坐骨神经接种后小鼠触摸引起的疼痛的效果。

　　方法：首先，构建携带Vglut3特异性短发夹RNA（shRNA）的重组单纯疱疹病毒1型载体。通过坐骨神经接种重组载体以在触觉疼痛的小鼠模型中测试其镇痛作用。 von Freyksilk和Hargreaves实验用于测试小鼠的机械触觉和热痛觉过敏，并通过免疫组织化学和Western印迹法评估背根神经节中VGLUT3的表达。

　　结果：我们已经成功构建了重组单纯疱疹病毒1型载体HSV-1-shvglut3、坐骨神经接种后，载体可以将Vglut3特异性shRNA逆行转运至背根神经节。将HSV-1-shvglut3载体接种到触觉疼痛模型小鼠中两周后，背根神经节中的VGLUT3表达被抑制，小鼠的机械爪退缩阈值升高至基础水平。这种镇痛作用持续了超过2周，没有明显的全身性副作用，并且小鼠的热痛阈值也没有明显变化。

　　结论：在背根神经节中表达的Vglut3是阻断触觉疼痛的有希望的靶标。我们构建的HSV-1-shvglut3载体通过外周接种具有特定的触觉疼痛，安全，有效和持久的镇痛作用。