动物实验 中国实验动物信息网 2020-08-27 758

　　目的：构建包含针对水泡谷氨酰胺转运蛋白3（Vglut3）的特定RNA干扰序列的单纯疱疹病毒1型载体，并观察其减轻坐骨神经接种后小鼠触摸引起的疼痛的效果。

　　方法：首先，构建携带Vglut3特异性短发夹RNA（shRNA）的重组1型单纯疱疹病毒载体。通过坐骨神经接种重组载体，以在触觉疼痛的小鼠模型中测试其镇痛作用。使用von Flake Silk和Hargreaves实验测试了小鼠的机械触觉和热痛觉过敏，并通过免疫组织化学和Western印迹评估了背根神经节中VGLUT3的表达。\r\n结果：我们已经成功构建了1型单纯疱疹病毒重组载体HSV-1-shvglut3、接种坐骨神经后，该载体可以将Vglut3特异的shRNA逆转至背根神经节。用HSV-1-shvglut3载体接种触觉疼痛模型小鼠两周后，背根神经节中VGLUT3的表达受到抑制，机械爪退缩阈值升高至基础水平。这种镇痛作用持续了超过2周，没有明显的全身性副作用。同样，小鼠的热痛阈值也没有明显改变。结论：Vglut3在背根神经节中表达，是阻断触觉疼痛的有希望的靶标。我们构建的HSV-1-shvglut3载体具有特异性触觉疼痛，通过外周接种具有安全有效的持久镇痛作用。\r\n目的：研究钙调神经磷酸酶（CaN）及其下游活化T细胞核因子（NFATc3）在球囊扩张后再狭窄中的作用，并为预防和治疗血管再狭窄建立新的理论基础。提供。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术组（n = 12），球囊组（n = 12）和环孢素（CsA）组（n = 12）。球囊组的大鼠由于球囊扩张而伤害了腹主动脉； CsA组的大鼠在手术前至实验结束前的第3天每天给予12.5 mg /（kg.d）-1的CsA。球囊损伤后30天，采集标本，用苏木精和曙红（HE）染色血管组织，并使用免疫组织化学检测血管壁中的CaN水平。在光学显微镜下观察病理变化。 mRNA表达；使用Elisa方法测定血清MCP-1水平。

　　结果：球囊损伤后新内膜出现在血管壁上，厚度不均匀；与球囊损伤组相比，CsA组的内膜增生和内膜/中膜厚度明显降低（P\u003c0.05）。与假手术组相比，球囊损伤组的血管壁组织中CaN蛋白和mRNA表达明显增加，NFATc3的mRNA表达明显增加，血浆炎症因子MCP-1水平也升高（ P\u003c0.05）。 CsA组的上述指标显着低于球囊损伤组（P\u003c0.05）。

　　结论：CaN-NFATc3通路参与大鼠球囊损伤后的再狭窄的发展； CsA通过抑制该通路减少再狭窄的形成。