动物造模,药效评价,肺炎 z-bio 2024-08-06 162

　　(1)复制方法  分泌型绿脓杆菌PAO1株和其变异株 PAOR在37℃胰蛋白胨大豆肉汤中培养过夜，离心后用PBS(pH 7.4)悬浮，再离心洗涤，沉淀用适量PBS(pH 7.4)悬浮。适量的悬液加入50℃融化的2％琼脂糖中配成终浓度为10000000～100000000CFU/ml的感染琼脂糖小球。4周龄SD大鼠按20mg/kg体重的剂量经腹腔注射克他命(keta mine)麻醉后，吸入乙醚使其痛觉消失，再在颈部开一小口，将0.1ml含1000000或10000000CFU菌液的琼脂糖小球经气管注入大鼠。

　　(2)模型特点  在单纯感染绿脓杆菌后引起的急性肺炎动物模型中，动物或死亡，或在48h内清除细菌。因此，大多数急性或慢性绿脓杆菌感染的肺炎动物模型均要求将绿脓杆菌包于生物膜(琼脂、琼脂糖、海藻藻酸盐)中，以防止气管对异物的机械清除。本模型采用将绿脓杆菌包于琼脂糖中，不用免疫抑制剂，也不需事先损伤模型动物的支气管和肺，即可得到典型的绿脓杆菌支气管肺炎模型。本模型制作方法简便，结果可靠，重复性好。

　　(3)比较医学  PA可分为黏液型及非黏液型两大类，其中黏液型PA致病性较强。因此，模型动物感染后引发疾病的严重程度与动物感染细菌类型有明显相关性，同时感染菌量也可决定感染疾病的严重程度。PA感染动物肺部均出现多灶性坏死和炎症细胞浸润；在相邻的气管壁可见炎性渗出液包围着含有细菌的小球，有时可见末梢支气管消失；在气管周围肺组织中可见大量的肺泡巨噬细胞浸润到肺泡间隔中，尚可见巨噬细胞中有吞噬细菌现象。但PAO1感染动物后肺部出现包括血管充血和中性粒细胞浸润等实质病变的急性肺炎，而PAOR感染动物后其肺部是以巨噬细胞浸润为主。