动物造模,药效评价,外伤后癫痫 z-bio 2024-08-06 166

　　1.造模材料  动物：Wistar大鼠，雄性，体重200～250g；药物：异戊巴比妥，FeCl3溶液；器械：大鼠立体定位仪，无线蓝牙脑电监测系统，高速牙钻，牙托粉，内径为2mm的聚氯乙烯细管1根(用作导入管)，针灸针若干。

　　2.造模方法  大鼠称重后以2％异戊巴比妥溶液(50mg/kg)腹腔注射麻醉，立体定位仪上固定。剪去头顶的毛，常规消毒头顶皮肤后沿头顶正中线切开头皮，切口长约3cm。剥离头顶筋膜，暴露颅骨。在左侧颅骨冠状缝后3mm、矢状缝旁2mm处用高速牙钻钻一直径为4mm的孔，星状切开硬脑膜。另外再钻5个安放电极的孔。将尖端塞有棉花(防止细管内FeCl3溶液溢出过快)的导入管尖端与软脑膜轻接触，细管内注有浓度为100mmol/L、pH为1.5的FeCl3溶液。将一输出电流为100μA的电源的正、负极各连一针灸针。连接电源正极的针灸针插入细管内FeCl3溶液中，连接电源负极的针灸针插入大鼠右前肢皮下。通电10min。

　　脑电记录：将前端钝圆的纯银丝置于上述钻好的安放电极的孔的硬脑膜外，用牙托粉将银丝与颅骨牢固地固定起来，银丝的另一端连接无线蓝牙脑电监测系统来监测大鼠的脑电图。

　　3.造模原理  铁具有致痫作用。

　　4.造模后的变化  大鼠在麻醉期间(术后1.5h内)偶有身体的轻微颤抖。清醒后约30min之内，大鼠活动较少，时有“湿犬样抖动”及挠头动作。清醒后0.5～1h期间，大鼠开始出现咀嚼自动症。表现为下颌快速咬动与面肌抽搐交替出现，在面肌抽搐的同时伴随出现与面肌抽搐节律一致的双眼眼裂变大，眼球向外凸出，持续时间约1～2min，约每20～30min发作1次。模型建立后2.5～4h之间约每5～10min发作1次。模型建立后5～7h之间，大鼠癫痫发作频率逐渐下降，约每0.5～1h发作1次。模型建立后8～24h之间约每2～5h发作1次，发作形式主要表现为咀嚼自动症。大鼠癫痫发作形式除咀嚼自动症以外，偶见身体左偏，跌倒，四肢抽搐。模型建立24h以后基本观察不到癫痫发作。

　　模型建立后1.5h时脑电图上首次出现癫痫波。癫痫波表现为频率明显加快、波幅明显高出背景波的尖波，起源于注射侧感觉运动皮质区，以注射侧及注射对侧的感觉运动皮质区显著，癫痫波出现的同时大鼠行为学上同步出现咀嚼自动症。

　　5.注意事项  实验时选用大鼠体重尽量在要求范围内，这类大鼠耐受力强，头部易被脑立体定位仪固定；手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作；颅骨钻孔时应注意深浅，一旦有突破感立即停止，防止引起大量出血。

　　术后大鼠应分开，等苏醒后3～5h才能合笼饲养，防止先醒的舔咬昏迷大鼠的伤口。饲养室内尽可能保持大鼠的最适温度、湿度。