动物造模,肾小管间质纤维化模型 中国实验动物信息网 2021-03-26 482

　　（1）繁殖方法戊巴比妥钠的麻醉方法是将30 mg/kg体重的静脉注射至体重为2至3 kg的新西兰兔，固定在其背部手术台上，并定期对腹部皮肤进行消毒。和脱发。在输尿管下方的腹膜直肠肌肉外侧进行直切口，在外侧斜肌动脉瘤上切口，暴露内侧斜肌，分离腹外侧，将腹膜向内推，并腹膜直截了当地分离，释放骨血管前面的输尿管并释放输尿管。用Allis镊子固定输尿管，用剪刀剪开输尿管直径的三分之一（此处距离肾盂4-5厘米），然后将F2导管逆行插入2-3厘米。尿液在输尿管的近端变得可见。导管排空后，用＃1丝线结扎输尿管的远端，固定输尿管和导管，并结扎并封闭导管的远端。它被埋在皮下用于标本采集。在给定的时间给模型兔静脉内注射3％的菊粉溶液，剂量为120-150 mg/kg体重。接下来，取梗阻性肾盂，非梗阻性肾盂和血样以确定菊粉水平和转化生长因子β1（TGF-β1）水平并处死动物。取肾脏标本并用10％甲醛固定。正常石蜡组织切片，HE染色，并用光学显微镜观察。

　　（2）模型特征手术后，模型动物阻塞侧尿中的菊粉浓度显着低于正常值，但阻塞侧尿中TGF-β1的浓度则明显低于正常值。它高于正常侧，阻塞侧的肾功能下降，TGF-β1的分泌显着增加。观察到，模型动物的总闭塞侧肾脏体积比正常人大，肾盂和肾盂增大，输尿管增大，管腔增大。显微镜下的组织病理学观察表明，被闭塞的肾脏的肾皮质部分充血水肿，炎症细胞浸润量不同；肾间质充血，水肿；炎症细胞浸润程度不同；肾小形态性肾小球和肾水肿基本正常，无明显变化。在该模型的梗阻早期，肾脏疾病主要为肾间质发炎，充血，水肿，在中晚期可发生肾间质纤维化和肾功能不全，肾小球逐渐收缩并取代薄的肾小球。组织。模型动物闭塞的肾脏中尿中菊粉水平的变化可以准确反映出肾小球滤过率降低的病理变化，并且在肾组织纤维化形成过程中TGF-β1持续过量，可能发生。该模型方法简单，实用性强，易于收集重复标本，可用于动态研究。在创建此模型的过程中，必须将导管插入的长度控制在2 cm至3 cm之间，以避免由于过度插入，肾盂和肾盂出血或感染而损坏肾盂粘膜和肾实质。

　　（3）比较医学单侧输尿管梗阻（UUO）肾病模型的特征是进行性肾小管间质纤维化伴有肾小球病变，但无高血压或血脂异常。临床上，单侧输尿管阻塞可由多种疾病引起。该疾病的持续发作可引起不同程度的肾功能不全，直至肾功能完全丧失。肾小球和肾小管间质纤维化的直接原因是各种细胞外基质，例如纤连蛋白（FN），I型，III型和IV型胶原蛋白，表皮硫酸盐蛋白聚糖（Biglycan）和其他蛋白聚糖。一系列生长因子和细胞因子的变化与这些ECM成分的合成和代谢密切相关。转化生长因子β1（TGF-β1）是*重要的细胞因子之一。 TGF-β1通过受体信号传导刺激胶原，纤维蛋白，层粘连蛋白和蛋白聚糖的细胞合成，并调节正常组织的损伤和修复。其过度生产与慢性纤维化有关。该模型在传统的单侧输尿管结扎方法的基础上进行了改进，并采用了内置输尿管来为单侧输尿管阻塞做准备。此外，可以获得通过常规外科手术方法创建的相同的受阻动物模型，并且具有肾损伤和纤维性病变的典型特征。已经证实模型动物可能具有降低的菊粉水平和增加的TGF-β1水平。它可以用于肾脏输尿管间质纤维化的病因学和药物治疗的动态和可重复研究。