动物造模,药效评价,脂肪肝 z-bio 2024-09-02 50

　　(1)复制方法  成年大鼠，每日喂养含2％胆固醇、10％猪油、0.3％胆酸钠等成分的高脂饲料，连续8周，或成年家兔，每日喂食含1％胆固醇、10％猪油的高脂饲料40g/kg体重和高胆固醇饲料80mg/kg体重，连续12周。造模毕，立即抽取全血及摘取肝组织，测定血中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、极低密度脂蛋白(VLDL)、碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量，采用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织中酞基辅酶A氧化酶(AOX)的表达，并对肝脏作组织形态学检查。

　　(2)模型特点  模型大鼠血清TC、TG、FFA、AST、 ALT升高，肝组织TC、TG、FFA含量增加，AOX表达增高；肝脏全小叶脂肪变性，属大囊泡性，并有大囊泡融合形成的脂囊；脂变肝细胞以中央静脉周围最明显；100％存在小叶内炎症，以单核细胞、淋巴细胞浸润为主，并可见点状、灶状、碎屑样坏死。模型家兔肝脏系数、血清TC和肝组织GSH- Px、MDA水平升高；肝脏肿胀，表面呈黄白色，油腻，肝组织有变性(颗粒变性或嗜酸性变)和坏死(溶解及点样坏死)，呈局灶分布并伴淋巴细胞浸润，并可见细胞质内充满大量大小不等的圆形脂滴；肝小叶排列紊乱、边界不清，但未形成假小叶；肝索结构紊乱，纤维组织轻度增生，肝窦和中央静脉间有红细胞堆积。

　　(3)比较医学  肝脏是脂质代谢的中心器官。在生理状态下，肝脏通过摄取从食物中吸收以及由乳糜微粒或脂肪细胞释放入血的FFA，用于合成TG、TC及磷脂和糖脂，这些合成脂与特异的载脂蛋白结合而被分泌入血浆，当来源于饮食或从脂肪组织中动员的FFA急剧增加，超过了肝脏脂质代谢动力循环平衡，则脂肪在肝细胞内开始大量堆积而形成脂肪肝。本脂肪肝模型即通过长期喂食高脂饲料所致。高脂饲料是指在基础饲料中加入一定比例的脂肪类食物，如5％～20％猪油、1％～10％胆固醇、5％～15％蛋黄粉等。为了促使病变的形成，在高脂饲料中还可添加胆酸钠或富含不饱和脂肪酸的物质如玉米油、鱼油等，后者尚易诱致脂肪肝伴炎症和纤维化。本模型动物通常选用大鼠和家兔。模型大鼠在采用高脂饲料持续饲养2～4周时可出现高脂血症，8～12周后肝脏呈中－重度大泡性脂肪变伴转氨酶升高。应用大鼠建立脂肪肝模型，有饲养方便、抵抗力强、食性与人类相近、模型复制成功率高等优点。家兔由于对外源性胆固醇吸收率高，对血中脂质清除率低，所以只要给予高脂饲料，不必附加其他因素，12周即可复制家兔脂肪肝模型，其病理特征表现为肝细胞胞质内充满脂滴，肝小叶中心纤维化和血管壁粥样斑块。相对模型大鼠而言，采用家兔复制脂肪肝模型，其不足主要包含两个方面，一为家兔作为草食动物，其脂质代谢与人类差异较大，二为动物抵抗力差，容易继发感染而死亡，但由于其操作方法简单，病变特征与人相近，模型复制成功率高、取血检验方便，仍作为脂肪肝模型而被广泛应用。