动物造模,药效评价,缺血再灌注肝损伤 z-bio 2024-08-22 158

　　(1)复制方法  体重18～22g的雄性KM种小鼠，按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉，麻醉后将动物仰卧位固定于手术板上，腹部手术区常规消毒和去毛；沿腹正中线切开，暴露腹腔后分离肠系膜上动脉，用无损伤动脉夹夹闭其根部导致缺血，控制缺血时间为20min；然后放开动脉夹恢复血流通畅，进行再灌流时间为1h，1h后取小鼠血(制备血清)并处死，动物尸解后取肝脏作常规病理组织切片。

　　(2)模型特点  采用本方法制作的小鼠肠系膜上动脉缺血再灌注肝损伤模型，模型动物缺血时其体内超氧化物歧化酶(SOD)活性降低，肝脏丙二醛(MDA)含量呈增加趋势，且超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的体内变化随缺血时间递增；肠系膜上动脉缺血20min和再灌注1h时，小鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine transaminase, ALT)和谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)活性可明显升高。镜下观察模型动物肝组织内肝小叶结构仍可见，但肝细胞呈水样变性，胞质疏松呈空泡状；部分肝细胞胞核浓染，已发生固缩、体积变小；肝组织内可见小灶性坏死，坏死灶内肝细胞结构已消失呈空网状，仅可见残留的细胞碎片及以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润。

　　(3)比较医学  缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury)是临床上外科常见的组织器官损伤，在严重感染、创伤、休克、心肺功能不全等疾病的病理演变过程中起重要作用。机体出现缺血再灌注损伤的发病机制，目前主要认为，与缺血时体内可生成大量氧自由基，而导致与缺血有联系的组织器官脂质过氧化有关。由于机体内肝脏和肠道血管分布的特点，机体肠缺血再灌注可引起肝损伤，甚至可引发多系统器官功能不全综合征。本方法复制的小鼠缺血再灌注肝损伤模型，模型制作过程中应注意小鼠的保温保湿，关闭腹腔后腹部要覆盖纱布，并适时地往纱布上补充生理盐水。本模型可模拟临床上患者的缺血再灌注肝损伤，对探讨缺血再灌注损伤的发病机制及药物干预具有一定的实用价值。