动物造模,药效评价 z-bio 2024-08-21 72

　　(1)复制方法  成年大鼠，灌胃给55℃15％氯化钠(NaCl)溶液或单纯给55℃蒸馏水10ml/kg体重，每日1次，连续12～32周。期间连续观察动物的一般活动状况，造模毕，麻醉开腹取胃，沿大弯剪开作大体观察，包括黏膜的色泽、弹性、皱襞多少、黏液是否丰富，沿小弯快速取材，包括胃窦及部分胃体，然后作组织病理学检查。慢性萎缩性胃炎标准的制定参照1994年美国休斯敦胃炎诊断分类标准及2000年井冈山胃炎分类标准，采用显微测微器对黏膜厚度、腺体宽度及细胞厚度进行测量。

　　(2)模型特点  15％NaCl热水溶液灌胃2周，胃黏膜肌层与黏膜层之间开始有少量嗜酸性细胞和淋巴细胞浸润，4周时量变多，6周时黏膜腺体变窄，黏膜肌层与腺体之间距离加宽，其间有较多淋巴细胞和纤维母细胞增生，增生的纤维母细胞与黏膜腺体平行，嗜酸细胞减少，8周时可见纤维母细胞增生明显，黏膜肌层的平滑肌呈钉突状向黏膜固有层插入，血管扩张充血，可见少量淋巴细胞和嗜酸细胞浸润，10～12周时胃黏膜腺体明显缩小，黏膜肌层的平滑肌呈束状增生插入黏膜固有层中，腺体上1/3～2/3腺上皮萎缩，腺管腔增宽，胃小凹颈部黏膜宽度变窄。此时，电镜可见模型动物胃黏膜细胞表面粗糙，黏膜表面糜烂、扁平，32周时胃黏膜细胞萎缩、腺腔直径增大、细胞表面破渍，有纤维性渗出。单纯热水灌胃至24周时，胃黏膜腺体明显缩小，腺体上1/3至2/3腺上皮萎缩，程度基本同15％NaCl热水溶液灌胃10～12周时的组织病理学改变，32周时大鼠胃黏膜萎缩越加明显。扫描电镜可见，24周时，胃黏膜细胞萎缩、腺腔增大并见出血现象；32周时，除见胃黏膜细胞萎缩、腺腔增大更加明显外，并见大量上皮细胞脱落、细胞破损、局灶性黏膜糜烂。透射电镜显示，24周时，腺体萎缩，纤维结缔组织增生包绕腺体，腺腔不规则，腺细胞萎缩，细胞间距增大，胞质内细胞器减少，分泌颗粒减少并空泡化，粗面内质网明显扩张，可见少量细胞的胞核常染色质减少，异染色质增多，靠近核膜，出现早期凋亡现象，32周时，细胞萎缩更加明显，胞质内细胞器锐减，早期凋亡现象更加普遍。

　　(3)比较医学  慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系统的常见病，其发病率高，病程长，病情复杂，在胃黏膜癌前病变中占有重要地位。虽然，CAG的病因和发病机制至今尚未完全明了，但急性胃炎的多次发足和长期慢性刺激无疑与其发生和发展密切相关。实验证实，热水长期刺激亦会损伤胃黏膜，引起炎症反应；高盐可刺激胃黏膜，导致壁细胞的脱落，从而破坏胃黏膜屏障，引起萎缩性胃炎；热水加高盐这两种因素共同作用，更是加重了胃黏膜损伤的程度，加速了固有腺体萎缩的速度。本模型的最大特点是造模因素的选择比较贴近人类饮食习惯，具有造模周期短、方法简便、成模率高、重现性好等优点，且有黏膜固有腺体缩小，腺上皮萎缩，固有层内有淋巴细胞和嗜酸细胞浸润等病理特征，但却很难见有肠腺化生及假性幽门腺化生等病理现象。本模型比较适用于对饮食习惯与慢性萎缩性胃炎发生、发展以及癌变的相关性的研究。