目的:探讨上皮钠离子通道(ENaC)对破骨细胞功能和活性的影响。
方法:使用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录因子-κB受体激活剂配体,将大鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞。以1.5 x 104的密度接种12孔板。检查随机表并将3个孔分为1组和4组。阿米洛利(Ami,ENaC抑制剂)组的浓度与对照组不同。使用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定破骨细胞阳性;破骨细胞和骨碎片共培养以确定骨吸收囊泡的数量;使用RT-PCR破骨细胞标记酶基因组织蛋白酶K(CK)的表达。
结果:用不同浓度的Ami处理破骨细胞后,TRAP染色阳性的破骨细胞减少,破骨细胞形成和骨吸收受到抑制,破骨细胞特异性基因CK的表达降低。
结论:该实验证明ENaC在破骨细胞中在细胞水平表达,并调节破骨细胞的分化和骨吸收。这表明ENaC可能参与破骨细胞的功能调节,并表明破骨细胞与ENaC相关。