动物造模,药效评价,肺结核杆菌 z-bio 2024-08-06 154

　　(1)复制方法  用雌性Hartley豚鼠，中间对数生长期结核分枝杆菌用灭菌双蒸水稀释至所需的接种浓度，在喷雾器隔间装满5ml含有细菌的蒸馏水的空气传播装置，给每个豚鼠20～50个细菌。造模豚鼠感染结核杆菌后，机体针对结核杆菌产生应答，引起组织的损伤：在感染初期，在肺靠近气管和血管的实质组织出现小的、不连续的由含有嗜酸性颗粒的上皮巨噬细胞、粒细胞组成的紧密聚集物沉着引起的炎症；然后损伤的直径增大，并形成越来越多的肉芽肿性淋巴腺炎；后发展为典型性肉芽肿；最后在肉芽肿的晚期阶段，由多个肉芽肿形成密集的炎症区，肺泡结构消失，坏死中心形成典型性钙化，并在感染的中、后期出现肺纤维化，在感染后100～140d可引起豚鼠死亡。

　　(2)模型特点  不同感染途径、不同接种量引起动物感染的严重程度及存活时间不同，豚鼠腹腔注射2×1000000结核杆菌可存活4～8周，此模型用结核杆菌气溶胶少量感染豚鼠，引起豚鼠慢性感染肺结核，复制出与人类感染结核杆菌相似的症状。在感染结核菌前3个月，由于细胞介导的免疫应答和机体对结核杆菌的迟发性变态反应，豚鼠发生进行性肺部病变，尔后进入慢性感染期，出现肉芽肿、肺纤维化等慢性肺结核的典型症状，存活时间也较长。

　　(3)比较医学  豚鼠对肺结核菌敏感，只用20～50个细菌的气溶胶感染即可复制出豚鼠结核分枝杆菌疾病模型，其感染途径和人类自然感染途径相同，并出现慢性感染症状、干酪样病变与人类感染结核分枝杆菌相似的症状，因此豚鼠在结核分枝杆菌的病原体研究、疾病进程、免疫学研究和疫苗评价方面有着非常好的应用。但气溶胶感染细菌量不易控制，操作较难，且需要配备相关的仪器。豚鼠作动物模型的惟一缺点是缺少免疫学相关试剂，使与免疫应答相关细胞因子和细胞亚型难以定性和定量。