动物造模,药效评价,溃疡性结肠炎 z-bio 2024-08-06 164

　　1.造模材料  动物：Wistar大鼠，雌性，体重(180±10)g；药物：戊巴比妥，青霉素；器械：体定位仪，电子刺激器。

　　2.造模方法  造模大鼠腹腔注射戊巴比妥40mg/kg麻醉后固定于江湾Ⅰ型脑立体定位仪上，按照Ktinig图谱确定大鼠左右杏仁核，坐标为前囟后30mm，旁开48mm，硬脑膜下88mm，插入两根直径为0.25mm的绝缘双极电极，尖端分开约0.25mm，另一端分别焊接一微型插头；电极和微型插头用牙托粉固定在颅骨表面。术后连续3天腹腔注射青霉素10万u，预防感染。

　　术后两周，每天一次恒流刺激右侧杏仁核，参数为400μA单相方波，波宽1ms，频率60Hz，持续时间1s。记录脑电变化及放电潜伏期、后放电时程和发作强度。放电潜伏期为刺激结束到刺激核团出现高幅棘波放电的时间；后放电时程是指刺激后杏仁核EEG波幅至少为刺激前的两倍和频率在1Hz以上的放电持续的时间；发作强度根据Racine法进行行为分期：Ⅰ.不动、闭眼、胡须动、嗅；Ⅱ.点头、咀嚼伴有面部抽搐；Ⅲ.一侧前肢抬起，阵挛；Ⅳ.站立并伴有两侧前肢的阵挛；Ⅴ.站立、跌倒，伴有全身性阵挛发作。连续5次出现第Ⅴ期反应即为完全点燃。

　　3.造模原理  电刺激杏仁核引起动物癫痫。

　　4.造模后的变化  刺激后左右杏仁核均出现高幅高频的痫性放电，随刺激次数增加，后放电时程进行性延长，由开始刺激时的(10±2.1)s到首次出现第Ⅴ期反应时的(45.3±5.4)s；至完全点燃需刺激次数为(13.3±4.2)次。

　　5.注意事项  手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作。

　　术后大鼠应分开，等苏醒后3～5h才能合笼饲养，防止先醒的舔咬昏迷大鼠的伤口。饲养室内尽可能保持大鼠最适温度、湿度。