动物造模,药效评价,角膜损伤 z-bio 2024-08-02 275

　　角膜损伤根据层次的不同，可分为角膜内皮的损伤和角膜上皮及基质损伤。角膜内皮的损伤可通过机械损伤法(针头刺入前房对内皮进行刮除等)和穿透性角膜冷冻法等进行复制。角膜上皮及基质损伤也可以通过机械损伤法(切除家兔角膜板层及角膜缘的结膜及角膜缘上皮)或激光损伤来实现。以下主要介绍激光角膜损伤模型。

　　【造模机制】眼是机体中对激光最为敏感、最易受损伤的靶器官。激光致眼损伤的部位主要为角膜及眼底视网膜，激光参数的不同会对损伤部位和程度造成很大影响。角膜是眼球最前面的一层薄膜，对于波长短于280nm的远紫外线吸收率接近100％，对于1900nm以上的中红外和远红外线角膜是全吸收体。因而，角膜易受紫外及中远红外激光损伤。CO2激光的波长为10.6μm，为一种远红外激光。生物组织对CO2激光的吸收系数很大，其生物作用机制主要是热作用，当低能量输出、短时间照射时，CO2激光能量的98％被角膜最初的40μm厚度所吸收，而且主要被富含水分的上皮细胞吸收，引起很小的热扩散，造成角膜损伤及瘢痕形成。

　　【造模方法】实验动物麻醉后，立即以CO2激光垂直照射角膜中央，光斑直径5mm，每天2次氯霉素滴眼，裂隙灯显微镜观察并持续2个月。

　　【模型特点】角膜损伤轻者出现白色或灰白色凝固斑，这种损伤是可逆的，愈后不留瘢痕；损伤较重者，可累及角膜基质深层，愈后留瘢痕，遮挡瞳孔时影响视力；重度损伤者可造成角膜穿孔，引起失明。

　　【模型评估和应用】家兔实验研究表明，在照射时间1秒、功率密度127W/平方厘米时，最终60％角膜出现穿孔，40％角膜出现瘢痕，瘢痕直径6.8mm左右，个别的有血管增生，瘢痕深达角膜全层。照射时间1秒，功率密度102W/平方厘米时，30天后全部角膜均出现瘢痕，瘢痕直径6.4mm左右；相同功率密度照射0.5秒时，20天后全部出现瘢痕，瘢痕直径5.7mm左右。功率密度62W/平方厘米，时间0.5秒，16天后全部出现瘢痕，瘢痕直径5.3mm左右。因此，认为角膜瘢痕模型较合适的激光参数为能量密度30～100J/平方厘米，瘢痕形成时间为照后15～30天。在建立角膜损伤模型时，激光照射前角膜的暴露情况不同会造成角膜表面水含量不同，从而影响角膜损伤程度。