动物造模,药效评价,慢性阻塞性肺疾病 z-bio 2024-07-31 118

　　方法一

　　1.造模材料  动物：清洁级Wistar大鼠，体重185～220g，雌雄不限；药物：肺炎克雷伯杆菌(6±10的8次方CFU/ml)。

　　2.造模方法  对照组经鼻腔注入细菌常规培养液0.1ml，每周2次，持续2个月。造模组经鼻腔注入肺炎克雷伯杆菌液0.1ml，每周2次，持续2个月。经鼻腔注入具体方法为：以消毒的1ml注射器(上连5.5号注射针，针尖紧套塑料胶管)吸取培养液或细菌菌液0.1ml，针尖进入大鼠鼻腔内，趁大鼠吸气时注入液体。

　　3.造模原理  细菌感染导致动物慢性阻塞性肺疾病。

　　4.造模后的变化  对照组气管、支气管表面纤毛排列整齐，无脱落。造模组气管、支气管自第1周起纤毛粘连、倒伏，部分脱落，随感染时间延长，纤毛脱落愈明显。

　　对照组，细支气管上皮细胞无变性，肺泡腔内无渗出物，肺泡隔无增厚。造模组第1天，细支气管管壁少量中性粒细胞浸润。局部区域肺泡内见中性粒细胞和少量红细胞渗出。第1、2周，细支气管管腔内有少量黏液、淋巴细胞和巨噬细胞；细支气管上皮细胞表面纤毛尚完整，但细胞间隙增宽；管壁炎症逐渐向周围蔓延扩散，炎症细胞以淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞为主。个别肺泡偶见淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞渗出。第4周，单位面积内细支气管数量减少，呼吸性细支气管管腔狭窄和闭塞相对增多；细支气管上皮细胞损伤较重，杯状细胞增生。管壁淋巴细胞和巨噬细胞浸润明显增多，肺泡腔内可见少数肺炎克雷伯杆菌。细支气管邻近区域肺泡隔和肺泡腔炎症明显，肺泡隔淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞浸润增多，该区域也常见局灶性肺泡隔破坏，多个肺泡相互融合形成肺气肿。第8周，少部分细支气管管壁平滑肌细胞和纤维组织较明显增生。第16周，部分呼吸性细支气管管腔内黏液形成，细支气管管壁平滑肌细胞和纤维组织明显增生，肺间质纤维化也较明显。

　　造模组早期，肺小动脉周围水肿，逐渐有淋巴细胞和浆细胞浸润。第4周起，小动脉管壁较明显增厚，血管内皮细胞和平滑肌细胞增生。

　　造模组感染第4周至第16周，大鼠细支气管管壁均明显增厚，并且随时间延长管壁增厚愈明显。造模组第1周，大鼠细支气管管腔开始出现狭窄，第4周起，管腔狭窄程度加重。

　　造模组至感染第16周，动脉血氧分压PaO2[造模组(9.18±0.93)kPa，对照组(12.37±2.79)kPa]明显降低，血二氧化碳分压PaCO2[造模组(8.55±0.33)kPa，对照组(4.39±0.80)kPa]明显升高。

　　自第4周起，造模组大鼠右心室收缩压(RVSP)明显升高，造模组为(4.24±0.40)kPa，对照组为(2.30±0.25)kPa。

　　造模组第16周时右心室肥大指数(right ventricular hypertrophy index, RVHI)明显升高为0.48±0.07，对照组为0.28±0.02。

　　方法二

　　1.造模材料  动物：清洁级Wistar大鼠，体重185～220g，雌雄不限；药物：肺炎链球菌(6×10的8次方CFU/ml)。

　　2.造模方法  对照组经鼻腔注入细菌常规培养液0.1ml，每周2次，持续2个月。造模组经鼻腔注入肺炎链球菌液0.1ml，每周2次，持续2个月。经鼻腔注入具体方法为：以消毒的1ml注射器(上连5.5号注射针，针尖紧套塑料胶管)吸取培养液或细菌菌液0.1ml，针尖进入大鼠鼻腔内，趁大鼠吸气时注入液体。

　　3.造模原理  细菌感染导致动物慢性阻塞性肺疾病。

　　4.造模后的变化  对照组气管、支气管表面纤毛排列整齐，无脱落。造模组气管、支气管自第1周起纤毛粘连、倒伏，部分脱落，随感染时间延长，纤毛脱落愈明显。

　　对照组，细支气管上皮细胞无变性，肺泡腔内无渗出物，肺泡隔无增厚。造模组第1天，细支气管管壁少量中性粒细胞浸润。局部区域肺泡内见中性粒细胞和少量红细胞渗出。第1、2周，细支气管管腔内有少量黏液、淋巴细胞和巨噬细胞；细支气管上皮细胞表面纤毛尚完整，但细胞间隙增宽；管壁炎症逐渐向周围蔓延扩散，炎症细胞以淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞为主。个别肺泡偶见淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞渗出。第4周，单位面积内细支气管数量减少，呼吸性细支气管管腔狭窄和闭塞相对增多。管壁淋巴细胞和巨噬细胞浸润明显增多，肺泡腔内可见少数肺炎克雷伯杆菌。细支气管邻近区域肺泡隔和肺泡腔炎症明显，肺泡隔淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞浸润增多，该区域也常见局灶性肺泡隔破坏，多个肺泡相互融合形成肺气肿。第8周，少部分细支气管管壁平滑肌细胞和纤维组织较明显增生。第16周，部分呼吸性细支气管管腔内粘液形成，细支气管管壁平滑肌细胞和纤维组织明显增生，肺间质纤维化也较明显。

　　造模组早期，肺小动脉周围水肿，逐渐有淋巴细胞和浆细胞浸润。第4周起，小动脉管壁较明显增厚，血管内皮细胞和平滑肌细胞增生。

　　造模组感染第4周，大鼠细支气管管壁增厚最明显，以后略有减缓。造模组第1周，大鼠细支气管管腔开始出现狭窄，第4周起，管腔狭窄程度加重。

　　造模组至感染第16周，PaO2[造模组(9.98±1.99)kPa，对照组(12.37±2.79) kPa]降低，PaCO2[造模组(6.44±3.66)kPa，对照组(4.39±0.80)kPa)]升高。

　　自第4周起，造模组大鼠RVSP明显升高，造模组为(4.18±0.60)kPa，对照组为(2.30±0.25)kPa。

　　造模组第16周时RVHI明显升高为0.43±0.07，对照组为0.28±0.02。