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【动物造模-药效评价】-免疫复合法建立大鼠溃疡性结肠炎模型

  1.造模材料  动物:健康Wistar大鼠,雌雄各半,体重约200g左右;健康家兔;药品:完全福氏佐剂,甲醛溶液。

  2.造模方法  用新鲜的家兔结肠黏膜制成组织匀浆,以4000r/min速度离心30min,取上清液提纯,根据考马斯亮蓝染色法测蛋白含量,与等量完全福氏佐剂配成抗原乳化液。正常组每天正常饲养,不做处理;模型组免疫大鼠于第1天开始注射抗原乳化液,分别注射于大鼠的左侧足跖、腹股沟及背部,每只需8mg(约0.86ml),第15天依同法,注射等量抗原乳化液于右侧足跖、腹股沟及背部。第29天将模型组大鼠用2%甲醛溶液灌肠,留置1h,用生理盐水洗脱,再用抗原液(不含佐剂)1ml灌肠,留置2h。

  3.造模原理  异体结肠黏膜组织致敏加甲醛刺激导致动物结肠炎。

  4.造模后的变化  接受免疫的模型组大鼠于第3周开始出现软便、稀便,有食欲减退、倦怠、竖毛、拱背等症状,并有黏液血便,体重下降明显;正常组大鼠大便正常,体重略有增加,其他无变化。

  正常组大鼠:结肠黏膜完好,无炎细胞浸润及溃疡,黏膜上皮完整、连续,腺体排列整齐,黏膜下固有层内血管纤维内质正常,肌层无异常;模型组大鼠:黏膜表面大量炎细胞浸润,可见大片溃疡面,个别可深达肌层,腺体破坏严重。

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