动物造模,药效评价,低温游泳脑缺血 z-bio 2024-07-25 1121

　　1.造模材料  动物：ICR小鼠，雌雄各半，体重18～22g。

　　2.造模方法  距离尾根2mm的尾巴上系上一个相当于5％体重的橡皮泥球，10～10.5℃的水中游泳5min，取出。用大剪刀迅速断头，记录断头的喘气时间。

　　3.造模原理  低温负重游泳后断头导致脑缺血。小鼠断头后，因为血液供应的停止，残存的能量仅能供应大脑功能维持较短的时间。当ATP迅速降低到一定水平后，神经细胞膜上的Na+ -K+ -ATP酶的转运能力丧失，Na+、K+交换停止，大量的Na+蓄积在细胞内，而细胞外K+的浓度升高，膜电位发生变化，神经细胞的兴奋、传导功能丧失。文献显示：在完全缺血20s后，小鼠的大脑皮质的生物电活动消失。肌肉失去了神经兴奋的刺激，喘气活动停止。低温条件下，脑的多种酶的活性降低，能量代谢率下降，断头后，残存能量的消耗减慢，大脑的神经功能的持续时间延长，表现为喘气时间显著延长。

　　4.造模后的变化  模型小鼠断头后喘气时间为(23.0±5.94)s。

　　5.注意事项  在实验中，如果小鼠的平均体重较轻，水温应当调高些，如果平均体重较重，水温应当调低些，一般水温应控制在8～12℃内。水温确定后，在实验中应保持恒定，避免变化给实验结果带来的波动。在室温22～26℃内，一只小鼠游泳1次后，水温就可以上升0.5℃左右，所以，游1次就应当用冰水调整一次水温。冰水的温度恒定，在做好预试验的基础上，加入一定量的冰水就可以迅速使水温恢复到水温设定值，方便快捷。在整个实验中，水温的波动应控制在0.5℃的范围内。