动物造模,药效评价,急性肺损伤 z-bio 2024-07-23 135

　　1.造模材料  动物：健康雌性新西兰大白兔，体重(3.5±0.4)kg；药物：全氟异丁烯(perfluoroisobutylene, PFIB)纯度98％，氨基甲酸乙酯，生理盐水，肝素，高锰酸钾溶液；器械：空气压缩泵，微量注射泵，小动物呼吸机，多导生理记录仪。

　　2.造模方法  兔耳缘静脉注射25％氨基甲酸乙酯1mg/kg麻醉后固定，常规消毒铺巾，气管切开后插入气管插管。右侧颈总动脉插管，注入肝素3mg/kg(1mg=125U)抗凝，每小时补充1mg，用以监测动脉压和抽取血标本。右侧颈外静脉插管建立静脉通道(生理盐水5～10ml/h)。毒气混合室出气管(气流量1L/min)接呼吸机进气口(潮气量22.2ml/次，频率45次/min)，呼吸机出气口接毒气销毁装置(高锰酸钾溶液)。启动呼吸机，调试微量注射器注射速度，使毒气室PFIB浓度至实验值(0.3mg/L)后，将呼吸机出气口接气管插管，呼出气接毒气销毁装置，对兔进行机械通气，到预定时间(20～27min)关闭呼吸机，使兔自主呼吸新鲜空气。

　　3.造模原理  全氟异丁烯(PFIB)是多种含氟高分子化合物(氟塑料)生产过程中毒性最强的裂解产物，毒性约为光气的10倍，可导致严重肺损伤而致死。

　　4.造模后的变化  实验组8小时PaO2为(11.31±1.69)kPa，显著低于对照组(16.19±0.51)kPa。实验组lOh动脉血PaCO2为(2.33±0.59)kPa，显著低于对照组(3.66±0.13)kPa。

　　实验组吸入PFIB 10h后动物血压和心律均有下降现象。实验组动物处死时气管插管处有少量白色泡沫样分泌物涌出。

　　实验组的BALF总蛋白(0.472±0.061)％、清蛋白(0.176±0.060)％，肺湿干重比(6.87±0.06)及肺毛细血管通透系数(×10的-3次方)(85.7±10.90)均显著高于对照组[总蛋白(0.061±0.008)％、清蛋白(0.053±0.007)％，肺湿干重比(4.04±0.25)，肺毛细血管通透系数(×10的-3次方)(14.95±1.32)]。

　　对照组肺组织结构正常。实验组均出现不同程度肺水肿及肺出血改变，肺泡塌陷，肺间质瘀血、水肿，肺泡水肿、出血并出现大量中性粒细胞及巨噬细胞。

　　5.注意事项  实验动物的性别、体重应相对一致，以保证染毒剂量的一致性，减小抽样误差；严格无菌操作，避免感染因素对实验结果的干扰；为了保持血流动力学的稳定，静脉补液的速度和数量均要受到限制，避免人为因素引起血液指标的改变和(或)造成高血容量性肺水肿；各实验组及对照组10h后血压和心律均有下降现象，如欲延长观测时间，需间断补充葡萄糖溶液以保证热量供应，避免动物衰竭；需进行呼吸道管理，保持呼吸道通畅，避免气管插管被血痂和分泌物堵塞引起窒息。实验中途肝素追加量不易过大，能够保证动脉插管通畅即可，避免切口或气管黏膜渗血堵塞气管插管从而影响动物肺通气功能。