动物造模,药效评价,白内障 z-bio 2024-06-19 317

　　【造模机制】  自然界中紫外线(ultra violet,UV)分为UVA(315～400nm)、UVB(280～315nm)和UVC(100～280nm)。大气臭氧可吸收波长小于280nm的 UV，射入地面的是UVB和UVA。晶状体最敏感的 UV波长为300nm。紫外线损伤晶状体上皮细胞膜蛋白，导致其离子平衡紊乱，并通过细胞间连接影响到上皮下的纤维细胞，继而细胞内渗透压增高，细胞水肿，白内障形成。另外，色氨酸吸收紫外线后转变为N-甲酰犬尿氨酸及3-羟犬尿氨酸，它们与O2反应生成氧化剂，最终导致晶状体蛋白变性。

　　【造模方法】成年豚鼠、大鼠和家兔均可。散瞳可用1％阿托品液，每周至少2次，大鼠宜使用双星明眼液和去氧肾上腺素眼液扩瞳。成模时间与照射方法、剂量和照射时间相关。通常认为5kJ/平方米的300nmUV是引起兔眼晶状体永久性损害的阈值剂量。36kJ/平方米的300nmUV每日照射大鼠30分钟可于1周后观察到显著的晶状体混浊。但若将豚鼠饲养在四周安装有能产生300～400nm波长的紫外线灯的环境中，则需要饲养2～14个月才可观察到白内障的形成。

　　【模型特点】随着时间的延长，晶状体出现不同程度的浑浊。浑浊的部位主要在晶状体的中央部及前后皮质，呈小点状、空泡状、片状或羽毛状。光镜检查正常的晶状体上皮层较薄，晶状体纤维呈方砖状排列；而紫外线照射性白内障晶状体表现为晶状体纤维肿胀，分布厚薄差异较明显，病变明显区域纤维层次少，空泡变性和撕裂明显并互相融合，可见聚集成团的嗜酸性小体和泡状细胞。晶状体核染色深浅不均。晶状体上皮明显增厚。电镜检查也见晶状体纤维明显肿胀、纤维间隙明显增宽等。

　　【模型评估和应用】采用室内紫外线弥散照射豚鼠造模，简便易行，接近正常情况下高纬度地区白内障形成条件，但造模周期长，试验过程中动物饲养管理困难。瞳孔大小和照射剂量是影响造模成功的关键。大剂量直接照射节省试验时间，目前应用较多。适用于老年性白内障及白内障氧化损伤的研究。