目的:利用显微注射技术注射敲除TXNIP基因的TALE MRNA获得TXNIP敲除小鼠。
方法:在线设计TXNIP敲除位点,构建栽粤蕴耘晕载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到c5b7l/6j小鼠受精卵,对f0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。
结果:在TXNIP第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点,并在细胞水平验证具有剪切活性,注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠,其中2只TXNIP发生移码突变,成功制备了TXNIP敲除小鼠。