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【动物造模】-过表达miR-181a-5p的口腔癌皮下移植瘤小鼠模型的小肠代谢组学研究

  目的 通过检测口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢通路的变化,分析过表达 miR-181a-5p 对皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢物组的影响。

  方法 实验分为 3 组,空白对照( Control) 组、阴性对照 (negative control, NC)组以及实验(over expression of miR-181a-5p, OE)组。 将不同组别处理后的细胞混悬液,通过 皮下注射到 M-NSG 重度免疫缺陷雌性小鼠右侧腹股沟中上部,构建成口腔癌皮下移植瘤小鼠模型。 按时记录小 鼠体重变化,对小鼠小肠组织进行 HE 染色,观察各组病理变化。 采用超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用仪 和串联 Orbitrap 质谱联用仪检测 NC 组、OE 组和 Control 组小鼠小肠中的代谢物,使用 XCMS 预分析原始数据,质量 评价样本数据,鉴定 Control 组与 NC 组、NC 组与 OE 组的差异代谢物,进行 KEGG 富集分析获取差异代谢通路。

  结果 Control 组和 NC 组小肠组织中共鉴定出 170 种差异代谢物。 代谢物富集的显著性信号通路包括胆碱代谢、丙 氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、γ-氨基丁酸 (GABA) 神经突触代谢、甘油磷脂代谢、环磷酸腺苷( cAMP) 信号通路 代谢、癌症中心碳代谢以及烟酸和烟碱胺代谢通路。 NC 组和 OE 组相比,小鼠小肠中检测到 VIP ( variable importance in the projection)>2 的差异代谢物有 16 种,显著性差异代谢物包括甘油磷酰胆碱、棕榈酸、3-羟基丁酰 肉碱、β-羟丁酸等。 代谢物富集到的显著性差异通路为胆碱代谢通路。

  结论 口腔癌皮下移植瘤可引起小鼠小肠 的代谢物发生变化,主要改变了小肠中与能量代谢相关的代谢物。 过表达 miR-181a-5p 影响口腔癌皮下移植瘤小 鼠小肠代谢物,代谢物富集通路为胆碱代谢通路。

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