1.造模材料 动物:SD大鼠,体重250~350g,雌雄不限;药物:牛磺胆酸钠,生物蛋白胶,氯胺酮。
2.造模方法 实验鼠术前12h禁食,自由饮水。1%氯胺酮按1ml/100g体重的剂量腹腔注射麻醉。无菌条件下行上腹部正中切口约5cm,寻找十二指肠降部,辨别胆胰管走向。手术显微镜下将靠近肝门段的胆胰管先以小动脉夹予以夹闭,胆胰管汇入十二指肠处也以小动脉夹夹闭。以4号针头紧贴胆胰管汇入十二指肠处自肠外穿刺胆胰管,穿刺成功后接微量泵,稳定匀速地逆行注射5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g),于2min内注完,迅速以生物蛋白胶封闭穿刺口,保留约10min,待蛋白胶凝固且胰腺组织出现肉眼可见的出血肿胀后,撤除两个动脉夹,确认胆胰管通畅并无胆汁外漏后逐层关腹。术后皮下注射复方乳酸钠溶液,4ml/100g,1次/8h,对照组仅翻动胰腺后关腹。
3.造模原理 逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠致坏死性胰腺炎。
4.造模后的变化 发病后72h,模型组病死率为70%,假手术组为0。24h后与假手术组(0.55±0.09)ml相比,模型组(7.10±1.08)ml腹水重量显著增高;与假手术组(229±18)U/L相比,模型组(7463±787)U/L血清淀粉酶显著增高。
肉眼观察模型组可见大鼠胰腺出现明显充血水肿,胰腺包膜张力增高,出现不同程度的出血坏死,腹腔内出现大量的血性腹水,大网膜及肠系膜缘出现淡黄色的皂化斑,胃肠道明显水肿,并出现麻痹性扩张,双侧肾明显增大,颜色晦暗;光镜下胰腺腺泡极度肿胀,胰腺实质内小血管扩张充血,局部出现凝固性坏死,高倍光镜下可见大量炎细胞浸润,坏死胰腺细胞实质崩解,细胞核碎裂溶解,微血管破裂,造成大量红细胞溢至胰腺间质中。