动物造模 中国实验动物信息网 2022-06-08 953

　　目的：明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除（GGTA1-/-）的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性，对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。

　　方法：采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织，利用RT-PCR对SLA I类基因（SLA-1、SLA-3、SLA-2）扩增、克隆及测序，对序列进行BLAST分析，并采用生物信息学方法对SLA I类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。

　　结果：测序分析表明，共获得6条等位基因序列，其中4条为已公布的等位基因（SLA-1*0703、SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403），另2条为新等位基因（SLA-1*0401wz01、SLA-2*11wz01）。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%～72.1%。SLA-1*0401wz01、SLA-1*0703、SLA-2*11wz01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对，均仅在位点225、228处发生了突变（T→S、T→M），其他位点高度保守。SLA-2*11wz01和SLA-2*1102与人HLA I类基因NK细胞抑制性受体（killer inhibitory receptor，KIR）结合区氨基酸同源性较高，在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异，而在NKTA-2和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。

　　结论：从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发，GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因氨基酸序列与人HLA高度相似，可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。