目的: 建立一种评价芍药苷对大鼠背根神经节神经元细胞内游离Ca2+浓度影响的方法.
方法: 显微解剖获取大鼠背根神经节(DRG),通过胰蛋白酶消化,过筛,用DF-12和抗有丝分裂培养液交替培养纯化,获得原代大鼠DRG神经元细胞,并采用细胞免疫荧光技术测定DRG神经元细胞纯度;采用激光共聚焦显微成像技术,观察细胞内Ca2+荧光强度的变化,并对Ca2+荧光强度变化率进行分析,探讨芍药苷对DRG细胞内游离钙离子浓度及辣椒素受体的影响.
结果: 采用上述方法分离得到的DRG细胞纯度可高达95%以上,辣椒平可通过阻断辣椒素激活的瞬时受体电位通道的作用而抑制细胞内Ca2+的增加.芍药苷表现出与辣椒平类似的作用,可以阻断细胞外Ca2+内流.
结论: 芍药苷可能是通过作用于TRPV1通道,而抑制DRG细胞内Ca2+大量增加,本方法可以用于评价药物对大鼠DRG细胞内Ca2+浓度的影响.