动物造模,基因敲除 中国实验动物信息网 2023-06-30 1269

　　目的：检测高脂食物和 K / BxN 血清对 ApoE 基因敲除( ApoE- / - ) 小鼠免疫细胞分布的影响

　　方法:ApoE- / - 小鼠从 8 周龄开始饲喂高脂食物 17 周龄时腹腔注射抗 6-磷酸葡萄糖异构酶( glucose-6-phosphateisomerase GPI) 抗体呈阳性的 K / BxN 血清 每周注射一次 每次注射 0 2 mL  对照组饲喂普通食物 用同样的方法注射K / BxN 血清 分别于注射K / BxN 血清前后 ELISA 法检测小鼠血脂水平变化 游标卡尺测量踝关节肿胀程度 高脂食物和K / BxN 血清处理至26 周龄时分离脾脏细胞和骨髓细胞 经流式抗体染色后 流式细胞术分析免疫细胞的分布情况

　　结果：ApoE- / - 小鼠腹腔注射K / BxN 血清前后 饲喂高脂食物的ApoE- / - 小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C) 浓度 总胆固醇( TCHO) 浓度和甘油三酯( TG) 浓度均显著升高 主动脉瓣根部斑块面积显著增加提示无论是否注射K / BxN 血清 高脂食物都能使ApoE- / - 小鼠产生动脉硬化症状 且比饲喂普通食物的ApoE- / - 小鼠更严重 腹腔注射 K / BxN 血清前 各组 ApoE- / - 小鼠踝关节和关节炎评分( clinical score) 均处于正常水平 腹腔注射K / BxN 血清后 饲喂高脂食物的ApoE- / - 小鼠踝关节宽度和关节炎评分均低于饲喂普通食物的ApoE- / - 小鼠流式检测结果显示 饲喂高脂食物后注射K / BxN 血清使ApoE- / - 小鼠脾脏和骨髓的CD3+ T 细胞和CD19+ B 细胞下调 CD11b+ 巨噬细胞上调

　　结论：高脂食物和K / BxN 血清引起ApoE- / - 小鼠脾脏和骨髓的CD3+ T 细胞和CD19+ B细胞下调 CD11b+ 巨噬细胞上调 导致ApoE- / - 小鼠的动脉硬化症状加重 关节炎症状减轻