氧化应激损伤 中国实验动物信息网 2021-07-07 1386

　　目的：探讨雌激素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1氧化应激损伤的保护作用及其机制。

　　方法：体外培养的MC3T3-E1细胞用于空白对照组，H2O。对应组(300 μmol/L)、H2O2+雌激素0.1 μmol/L组、H、O2+雌激素1 μmol/L组、H、O、+雌激素10 μmol/L组和H、O、+AC 1 mmol/L 组 与药物浓度孵育。 CCK-8检测各组细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位。该试剂盒可检测丙二醛 (MDA) 和超氧化物歧化酶 (SOD) 水平。荧光探针法检测细胞。活性氧 (ROS) 水平；检测 WesternBlot Smad5、Runx2、Bax、Bcl-2 和 cleavedCaspase-3 中的蛋白质表达。与空白对照组相比，H、O、组小鼠成骨细胞增殖活性显着降低（Pu003c0.05），凋亡率和JC-1阳性细胞率显着升高。 (Pu003c MDA和ROS水平显着升高(Pu003c0.05)，SOD活性显着降低(Pu003c0.05)，Smad5、Runx2和Bcl-2蛋白的表达显着降低(Pu003c0.05) u003c0.05)，且Bax和cleavedCaspase-3蛋白表达显着增加(Pu003c0.05)；H，0.H，与组相比。O0，+雌激素1μmol/L组，H，O 、+雌激素10细胞增殖活性μmol/L组和H、O、+NAC 1mmol/L组显着增加（Pu003c0.05），细胞凋亡和JC-1阳性细胞比例显着降低（Pu003c0 .05），MDA和ROS水平显着降低（Pu003c0.05），SOD活性显着增加（Pu003c0.05），Smad5、Runx2和Bcl-2蛋白表达显着增加（Pu003c0.05），而Bax和cleavedCaspase-3蛋白表达显着降低（Pu003c0.05）。

　　结论：雌激素可能通过激活Smad5/Runx2信号轴的表达，降低氧化应激损伤的MC3T3-E1细胞内的ROS水平，提高其分化能力。