目的:建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型。
方法:为了充分模拟退行性椎间盘营养缺乏的微环境,本实验使用了含1%,3%,5%,8%和10%胎牛血清的DMEM培养基,并培养了椎间盘髓核细胞。使用*佳促凋亡浓度检测髓核细胞的凋亡率,凋亡相关蛋白Bax,bcl-2和caspase-3的表达,细胞增殖曲线以及免疫荧光分析。
结果:流式细胞术测量的髓核细胞凋亡率随着胎牛血清(FBS)浓度的降低而增加,而3%FBS是诱导凋亡的*有效浓度。蛋白质印迹显示Bax和caspase表达。 -3酶3%FBS组中bcl-2的表达明显高于10%FBS组。 CCK-8研究的结果表明,含有3%FBS的培养基具有更高的细胞凋亡率。 增加髓核细胞的增殖速率。晚了。免疫荧光分析显示3%FBS组的FAS表达明显高于10%FBS组。
结论:3%FBS诱导髓核细胞凋亡,*终可能导致细胞功能丧失。