动物造模,Ⅰ型变态反应模型 中国实验动物信息网 2021-03-29 360

　　1.卵白蛋白诱发的活动性过敏性结膜炎

　　（1）复制方法：在大鼠或豚鼠中加入1 ml卵清蛋白磷酸缓冲液（PBS）（100μg卵清蛋白，10-20 mg硫酸铝钾，pH 7.4（包括）腹膜内注射。 14天后，每只眼药水10-20μl的1 mol/LDDT可以消除结膜粘液屏障并提高发作效果。 15分钟后，以1.25 mg/100 g体重的剂量静脉内注射1 ml的0.125％Evans蓝色溶液，以判断血管通透性变化，并立即用10μl的5％卵清蛋白PBS溶液攻击。用10μl5％卵清蛋白PBS溶液滴眼液挑战组织学变化，而无需注射伊文思蓝。 （2）模型特征：给大鼠腹膜内注射卵白蛋白以从结膜肥大细胞中产生IgE抗体，IgE和F。受体结合和主动致敏。当抗原用于局部攻击时，活化的肥大细胞脱粒并释放过敏介质，从而增加局部血管的通透性并伴有局部嗜酸性粒细胞浸润。注射伊万思蓝可穿透眼组织并引起组织水肿。血管渗透性的变化可以根据化学反应程度，嗜酸性粒细胞浸润，肥大细胞脱粒和结膜组织提取物的光密度来测量。以反映结膜过敏的程度。 DL-二硫苏糖醇（DDT）是一种粘液溶解剂，可破坏结膜粘液屏障功能，因此高分子量卵清蛋白可穿透结膜并与组织中的IgE抗体结合，从而促进眼睛异常反应。 （3）比较医学眼过敏是主要由肥大细胞介导的1型过敏。细菌性结膜炎，春季角膜结膜炎，特应性角膜结膜炎和巨乳头状角膜结膜炎主要涉及I型过敏。诱导I型过敏的方法有很多，但*常用的动物是大鼠，豚鼠和小鼠。这种模型方法是针对I型过敏性药物的常规筛选方法，它客观，简单且快速（结膜炎的明显症状在发作后10分钟出现，在30分钟达到高峰，在1小时后消失），并且筛选结果是一致的。临床疗效基本一致。  2.抗原诱导的过敏性结膜炎（1）复制方法收集雌性豚鼠或雌性小鼠，并用10μl微量移液管将1.25 mg豚草粉（Ambrosiaartemisiaefolia）施用于动物的鼻腔和结膜下。在弯曲的山脊上。/d，连续5天，豚鼠需要在8-12天再次加强。在第15天，给豚鼠或小鼠施用抗原，并将1.25mg豚草粉喷到结膜下曲线上。抗原攻击后二十分钟，在裂隙灯下确定结膜充血和水肿的状态，以确定由同一卵清蛋白诱导的活动性过敏性结膜炎的标准。

　　（2）模型特征使用丁ax粉反复与正常豚鼠或小鼠的鼻粘膜和结膜接触会刺激结膜组织中特异性IgE抗体的产生，以及结膜上肥大细胞Fc的产生，受体使其主动过敏。 。当抗原攻击时，抗原和抗体的结合会导致局部肥大细胞脱颗粒并释放变应原，从而增加局部血管的通透性，引起充血性充血和水肿，并伴有嗜酸性粒细胞浸润。根据结膜充血，嗜酸性粒细胞浸润和肥大细胞脱粒的程度确定结膜过敏的程度。 （3）比较医学用这种方法引起的人眼过敏性结膜炎和花粉症结膜炎的病因和临床表现非常相似：①使用的抗原是*常见的空中抗原。 （2）施用方法是*自然的过敏原接触方法。 ③不需要佐剂。 ④动物会引起高水平的抗豚草IgE以及明显的变应性结膜炎的临床和组织学症状。该方法可重现，经济，实用，快速，易于操作，可作为枯草芽孢杆菌结膜炎和其他抗过敏剂的筛选方法。免疫动物前的施用天数与豚草粉的天数相同。每天滴剂的数量由所测试药物的药效学和药代动力学性质决定。  3.卵白蛋白引起的被动性过敏性结膜炎

　　（1）复制方法将豚鼠或对卵白蛋白致敏的大鼠的血清10μl注入正常豚鼠或大鼠的结膜下，使被动结膜致敏。进行了挑战。给血管通透性改变的动物静脉注射1 ml的含100μg卵清蛋白的0.1％Evans Blue溶液。仅将10μl的1％卵清蛋白PBS溶液静脉内注射到具有确定的临床和组织学变化的动物中。埃文斯蓝色解决方案。 （2）模型特征：将致敏的豚鼠或大鼠（含有丰富的IgE抗体）的血清结膜下注射至正常的豚鼠或大鼠。 IgE与结膜肥大细胞上的Fc受体结合并使其被动致敏。当抗原攻击时，肥大细胞释放过敏原，增加局部血管通透性和结膜嗜酸性粒细胞浸润。通过测量渗入眼睑和结膜的伊文思蓝的量以及嗜酸性粒细胞的数量，可以反映出结膜过敏的程度。 .. （3）比较医学该模型方法可以用作抗I型过敏性药物的常规筛选方法。给药途径和给药持续时间由所测试药物的药代动力学和药代动力学性质决定。

　　4.48/80过敏性结膜炎（）（1）复制方法收集一只健康的成年大鼠，并以1.25 mg/100 g体重的剂量静脉内注射1 ml 0.125％Evans蓝溶液。 15分钟后，使用比10μl更深的48/801 mg。将PBS（pH 7.4）注入眼睛。二十分钟后，处死动物并移开眼睑和眼球。对于具有确定的临床和组织学变化的动物，仅使用10μl48/80 PBS溶液即可攻击动物，而无需注射伊文思蓝。 （2）模型特征48/80通过测量渗透到眼睑和结膜的伊文思蓝的量直接诱导肥大细胞的非免疫性脱粒，释放过敏性介质和结膜血管，增加通透性和结膜嗜酸性粒细胞浸润。结膜过敏反应程度。 （3）比较医学48/80是在体外和体外研究中广泛使用的肥大细胞脱粒剂。它通常用于研究抑制各种免疫和非免疫肥大细胞脱粒的药物的功效。在48/80滴眼药水之前2天使用实验药物，每天滴药的次数由所测试药物的药效学和药代动力学特性决定。

　　5.组胺引起的过敏性结膜炎

　　（1）复制方法向豚鼠静脉内注入1 ml伊文思蓝溶液（1 g/L），然后向模型的一只眼睛中注入20μl测试药物。动物.. 40分钟局部给药后30分钟，将豚鼠麻醉，并用组胺300n9 /μl结膜下注射或组胺溶液25 /μl（7.5-10μg/ ml）滴眼液攻击以定量反应。 （2）模型特征组胺是一种过敏介质，是导致过敏性结膜炎的主要成分。向豚鼠结膜下注射组胺可直接增加眼结膜血管的通透性，并可引起组织水肿。

　　（3）比较该方法在医学上产生的过敏性结膜炎模型，该方法简单易行，易于控制病情，因此适合于抗过敏性眼科药物筛选的研究。