动物造模,肝衰竭模型 中国实验动物信息网 2021-03-24 1856

　　（1）复制方法成年小鼠以900 mg/kg体重的剂量注射扑热息痛（paracetalol，APAP），成年大鼠以相同方法注射500 mg/kg体重的APAP，或成年实验犬用二甲基将可溶解APAP的亚砜（DMSO）分别在0、9和24小时皮下注射。*个剂量为750 mg/kg体重，*后两个剂量为200 mg/kg体重。对小鼠或大鼠给药后，连续观察其总体情况，记录有毒物质导致的死亡时间，并定期收集血液以进行肝功能检查，并取出肝脏进行组织学形态学检查。给药实验犬后，除了观察一般情况并记录死亡时间外，还检测了各个时间点的心律，心率，呼吸频率和尿量等生理指标，并在其中收集了血液。肝..在进行功能测量之后，收集模型动物的死亡或人工处死，收集肝脏，心脏，肺，肾脏和其他器官和组织以进行病理检查。

　　（2）模型特征小鼠给药7小时后，动物血清ALT，AST和TBIL显着增加，PT延长，凝血酶原活性（PA）降低，血浆主要氨基酸含量降低。 。 ）增加的含量明显高于增加的支链氨基酸（BCAA），肝组织显示出广泛的细胞损伤，肝小叶显示出片状或桥脑坏死，炎性细胞呈致密的肝巨噬细胞扩散扩散; 48小时时动物死亡率高达68.7％ ，其中男性死亡率为100％。当对雄性SD大鼠给药2小时后，总肝谷胱甘肽减少了90％，线粒体谷胱甘肽减少了58％。实验犬给药48小时，模型成功率为63％。经过建模，实验犬变得dog睡，活动和食物摄入减少，,睡，ALT，AST，ALP，NH3、BUN，支链氨基酸/芳香族氨基酸比率（BCAA /）。AAA）降低并且变化GLU，TBIL和电解质不明显。在显微镜下，肝脏组织显示出弥散性的肝细胞混浊，斑点坏死，嗜酸性粒细胞增多，片状坏死，部分肝细胞呈平衡不平衡，嗜酸性粒细胞增多和脂肪变性。肝正弦波的一部分扩张并充血，门静脉中有少量炎性细胞浸润，全部在48小时内死亡，平均生存时间为36小时（10-48小时）。

　　（3）比较医学APAP是一种常用的解热镇痛药。药物过量容易引起肝毒性，是国内外急性肝衰竭的常见原因之一。对于不同物种的动物，APAP引起的急性肝衰竭的机制基本上与人类相似。在治疗水平上，约60％的APAP与葡萄糖醛酸结合，而35％的与硫酸结合并被肾脏排泄。少量N-乙酰基-苯并醌亚胺（NAPQI）与谷胱甘肽（GSH）巯基（-SH）反应相结合是一种混合功能性氧化酶，不会引起明显的毒性。过量的APAP会饱和前两个代谢途径并增加NAPQI的产生。肝脏中GSH的耗竭作用于细胞结构，引起肝小叶中央坏死，从而导致急性ALT升高所致的肝衰竭。和AST，以及长期PT，肝细胞坏死等来自不同动物的肝细胞对APAP的毒性作用更为敏感，因此小鼠动物*敏感，其次是狗，兔子和猴子。因此，小鼠，大鼠和狗通常用作APAP的模型副本对象。诱发肝功能衰竭。复制APAP诱导的急性肝衰竭模型需要所有问题，包括剂量，给药途径，麻醉选择，是否添加诱导剂以及如何降低肝外毒性对模型的影响。事先考虑。尽管APAP具有剂量依赖性的毒性作用，但血液中APAP的水平与肝功能障碍的严重程度并不成比例。剂量较小的动物很难诱发急性肝衰竭，或者复制率太低且剂量太高。例如，如果口服剂量超过1000 mg/kg体重，则该动物可能伴有低血糖症。高铁血红蛋白血症或肺水肿。他因外部疾病去世不久。因此，小剂量的多剂量是*常用的建模方法。在正常情况下，给药15小时后，动物会出现低血糖，可通过静脉内输注葡萄糖缓解。给药后15-20小时，ALT开始升高，肝坏死开始，TBIL升高，GLU降低，白蛋白（ALB）降低，PT延长，并出现肝味。肝性脑病，肝昏迷和癫痫病在30-48小时后逐渐出现，并且当ALT达到峰值直至死亡时，肝脏组织的病理检查显示严重的中央小叶坏死。在复制模型的过程中，还应注意麻醉剂的选择和使用。一些常用的麻醉剂会加剧APAP的肝毒性。主要是硫喷妥钠，戊巴比妥钠，巴比妥酸钠，氟烷等。此外，有报道称同时使用谷胱甘肽合酶抑制剂（BSO）和APAP进行建模。在实验中，以2 mmol/kg体重的剂量向Beagle犬缓慢静脉内注入BSO，以使动物体内的谷胱甘肽合酶不可逆地失活。 2小时后，静脉内注射100mg/kg体重的APAP，并给予一定量的APAP。每小时静脉注射的血药浓度保持在150-250 mg/L的水平。肝细胞GSH耗尽后，APAP代谢产物NAPQI的浓度急剧上升，引起广泛的肝细胞坏死，成为急性肝衰竭的动物模型，在30-48小时后，该模型动物出现嗜睡，昏迷和死亡。使用APAP复制急性肝衰竭的动物模型具有许多优点，例如模型复制周期短，方法简便且价格低廉。但是，已显示出许多因素，例如模型的许多影响因素，高外毒素和可重复性差。那不是*佳选择。