心律失常,冠状动脉结扎 中国实验动物信息网 2021-03-18 631

　　(1)复制方法  体重为250～350g雄性大鼠，用乙醚麻醉后仰卧位固定。颈部正中切开皮肤，分离气管行气管插管术接人工呼吸机进行人工呼吸，通气量维持在15～20ml/kg体重，呼吸频率50～60次/min，通过三通管与盛有乙醚麻醉瓶相连，以维持麻醉。术前皮下注射阿托品0.2mg/只可减少呼吸道分泌物分泌。分离左颈总动脉，向心插入动脉插管，连接压力换能器，管腔内注入肝素盐水(1500U/ml)，以防管内凝血。分离左侧颈外静脉并插入直径为0.5～1mm的软塑料管，以备注射药物用。去除左侧胸毛，沿第四肋间作一长约2cm横切口，钝性分离胸大肌和胸小肌，沿胸骨左缘第四肋间向左切开胸腔，剪开心包膜暴露心脏，在冠状动脉左前降支下穿0号丝线，使丝线两端分别穿过并连在一起的2个小塑料环(直径3mm)，再将两端并在一起穿过一条直径1～2mm的硬塑料管，用套管针从后胸壁内面向外穿刺，经两肩胛骨之间达背部，将硬塑料管引出胸腔到背部，抽出套管针，保留塑料管于胸腔，并使其内部对准冠脉，塑料管外端固定后，连接于电子蠕动泵持续负压吸引2h，吸出胸腔内血液和气体，在正压呼吸下迅速闭合胸腔，逐层缝合胸壁肌和皮肤，除去气管插管，停止吸入乙醚和人工呼吸，动物自动呼吸平稳后缝合气管和颈部皮肤。肢体导联电极的安置是将直径为0.5mm，长约5cm的不锈钢丝穿入8号针头钢丝前端弯曲成3mm小钩，分别刺入左下肢和右上肢外侧皮下，小钩固定在皮下组织后，退出针头，保留钢丝电极，以供记录心电之用。术后第5日，将动物放置木制的小盆内，连接电极，记录Ⅱ导联心电图，将颈总动脉插管与压力换能器相连记录血压。动物自然活动30min后结扎冠状动脉，方法是操作者左手握住穿有结扎线的塑料管，右手逐渐拉紧双股结扎线，使塑料管推动2个塑料环而压迫闭塞冠状动脉，然后固定结扎线。通常于结扎4～6min后开始出现室性早搏，随后出现室性心动过速和室性颤动，部分动物可突然出现室性颤动而死亡。心律失常的严重程度在8～10min达到高峰，致死性室颤时常发生在6～11min，10min以后心律失常逐渐减轻，持续20min自然消失。结扎冠脉后6h处死动物，迅速取出心脏，切去心房及右心室，放入冰箱速冻1h，在冠脉结扎线下平行于冠状沟将心室等厚切成5片，放入0.1％硝基四氮唑蓝(N—BT)溶液中，于37℃恒温水浴振摇染色10min。正常心肌染为暗蓝色，梗塞区心肌不着色为浅红色，描记，扫描，利用Osiris软件计算出梗塞区面积占左室面积的百分比，观察药物对心肌梗死面积的影响。

　　(2)模型特点  清醒大鼠冠脉结扎的心律失常与麻醉大鼠相似，但程度更严重，清醒大鼠室颤的发生率和死亡危险系数均较麻醉大鼠为高。且可以观察在清醒状态下发生心律失常时动物植物神经以及交感神经的干预作用。

　　(3)比较医学 大鼠在麻醉和人工呼吸条件下，开胸结扎冠状动脉造成心肌缺血性心律失常是一方法简便成功率较高的研究抗心律失常药的方法，但麻醉下心血管功能及神经反射皆受到抑制，且麻醉药的种类和麻醉深度均会对心律失常产生影响。采用本方法建立的模型可克服上述缺点，为人体发病状态时机体自身调节功能的研究提供了动物实验手段。