新鲜的肝脏应灌注甲醛,可以固定普通组织,但可以溶解糖原和色素。
1.材料必须是新鲜的。如果长时间不进行处理,则会发生蛋白质降解和变性,细胞自溶和细菌生长,并且无法反映出人体组织的形态结构。
2.固定剂的类型很多,它们会使组织变硬和收缩的程度不同,它们对组织中的蛋白质,脂肪,碳水化合物和其他物质的作用也不同。例如,纯酒精可以固定糖原并溶解脂肪,而甲醛可以固定普通组织,而糖原和色素则可以。定影液可分为单一定影液和混合定影液。前者包括甲醛(甲醛,福尔马林),酒精,乙酸或冰醋酸,汞,渗透酸(四氧化os),重铬酸钾,苦味酸等。不可能使用单一的固定解决方案将所有组件固定在一个单元中。混合的固定剂可以弥补缺陷。常用的混合固定剂包括Bouin解决方案,Zenker解决方案,FAA解决方案,Carnoy解决方案和SuSa解决方案(有关食谱,请参阅相关技术书)。
小鼠肝组织石蜡切片过程:
1.取材
2.固定
3.洗涤与脱水
4.透明
5.浸蜡与包埋
6.切片
7.贴片与烤片
8.切片脱蜡及水化
9.染色
10.切片脱水、透明和封片
切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度。通常切片厚度为4~7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上。