微循环动物实验 中国实验动物信息网 2020-10-14 509

　　（1）动物麻醉

　　远在1944年的微循环研究中，发现将戊巴比妥钠注射入小型动物时，无法获得预期体重超过3 mg/100 g的血管动物。也有报道说，快速输注尿烷会引起血栓形成。因此，动物麻醉剂的选择和剂量以及麻醉剂的相容性是实验中的重要环节。

　　微循环实验研究中常用的一些动物麻醉剂的相容性和剂量：

　　1、猫：35毫克/千克体重腹膜内注射戊巴比妥钠：70毫克/千克体重氯醛糖或700毫克/千克体重氨基甲酸酯腹膜内注射； 75毫克/千克体重α-氯醛糖，静脉注射。

　　2、金黄仓鼠：腹膜内注射30 mg/kg的戊戊比妥钠（25 mg/kg的体重以缩短实验时间）。

　　3、兔：腹膜内注射35-40 mg/kg体重的戊戊比妥钠。

　　4、大鼠，小鼠和其他小动物：腹膜内或肌内注射25 mg/kg体重的戊戊比妥钠，或肌内注射尿烷130 mg/100 kg体重。当动物处于正常麻醉状态时，角膜反射受到抑制，并保持稳定的胸部呼吸。如果发生呼吸抑制或腹部深呼吸，则表明服药过量。以上麻醉量可以维持2-3小时的良好麻醉。如果需要继续麻醉，可以增加原始剂量的三分之一。

　　一些实验动物不需要麻醉并且可以清醒地进行，例如如何检查兔子眼球dy的微循环。

　　（2）恒温灌注

　　通常，动物器官和组织的灌注液必须与器官和组织周围的体液的成分和pH值完全相同。例如，肠系膜需要腹膜内液体环境，这很难做到。

　　Zweifach认为如下。无论使用哪种灌注液，都必须首先使其成为胶体。也就是说，将明胶添加到灌注液中制成1％的明胶溶液。

　　您需要将适量的氧气和二氧化碳通过灌注液。应使用缓冲液（pH 7.35）将灌注液的pH值调节至中性。灌注液的温度应由控制器控制在动物的正常体温范围内。在整个实验过程中，应缓慢，连续地更换灌流液。常用的灌注液溶液包括林格氏溶液，泰洛德溶液，凯尔达氏溶液和生理盐水。灌注器和观察到的动物应放在可调恒温实验观察箱中。这在冬天尤为重要。将实验观察箱的温度调节至接近实验动物表面温度的温度，*好为25至30°C。

　　（3）照明设备

　　照明设备的温度通常不能超过动物的体温。*好将其保持在25-30°C。否则会引起血管扩张和异常血流。*好不要照明以改变血液的自然阴影。否则，将很难区分血氧饱和度。*理想的照明设备是光纤束冷光源，并且可以在没有可以伸入腹腔的冷光源照明棒的情况下进行实验，尤其是在观察肝脏，脾脏，肾脏和其他器官的微循环时。很难。

　　实验中使用的光源必须满足强，集中和“冷”三个条件。今天有两种常用的照明设备。一种是高压汞灯（220V，80W）。这种光源的优点是强光，较少的热量产生以及血管和背景色之间的强烈对比。缺点是血液颜色不切实际并且触发了光源。慢。另一个是卤素钨灯（5-12V，40-100W）。后者具有体积小，亮白光和启动快的优点。卤钨灯具有可调节焦距以实现“聚光”目的的透镜，可通过显微镜灯进行更换。然后在灯的前面添加一个蓝绿色的绝缘过滤器，以控制光源的温度。相对满足“冷光”要求。这种照明源可以在普通房间的显微镜下提供清晰的视野，并且对观察指数的影响很小。 （4）记录系统

　　显微显微术师经常记录动物微循环的瞬时变化。选择显微设备和相应的相清洁设备。为确保成功拍摄，所有体内摄影均应使用分光源，高速胶片（24度以上的粒子胶片）摄影。这是一个重要的问题，但它也可以改善对比度（使用绿色滤镜可以增强血管并对比背景色）。

　　相机是常用的录制工具。只能留下瞬时图像。如果可能，我们建议您拍摄电影和彩色录像带。

　　当使用示波器或多通道记录仪记录管直径扫描曲线，血流曲线和微压力曲线时，理想的是能够将上述信号记录并保存在微波中。