基本原理:将D-半乳糖在一定时间内连续注入动物体内,以增加体内细胞中半乳糖的浓度。通过醛糖还原酶的催化作用将其还原为半乳糖醇。该物质不会被细胞进一步代谢和积累。它会在细胞内部影响正常的渗透压,从而导致肿胀,功能障碍,代谢紊乱,破坏和耗尽人体的抗氧化防御系统并积累自由基。同时,当半乳糖还原为半乳糖醇,破坏细胞膜中的脂质,增加脂质过氧化物和脂质融合素并引起衰老时,会产生(O2-)。
步骤:
取一只健康的雌性老鼠,并以正常饮食喂养它。模型组小鼠每日在颈后皮下注射D-半乳糖(0.25 ml/10 g).6-8周后,小鼠运动缓慢,被毛呈灰色,身体稀薄且明显它显示出老化迹象,并提供了亚急性老化模型。空白对照组还每天皮下注射生理盐水(0.25 ml/10 g)。在*后一次给药和D-半乳糖之后两个小时,进行了学习和记忆训练实验(避免黑暗实验),第二天测量了记忆分数,并从眼眶收集血液并处死。取小鼠胸腺,脾脏,脑,肝和心脏的组织以确定衰老的各种指标。
直通测试:反光盒分为5个单独的盒子,每个盒子的尺寸为36厘米x 12厘米x 12厘米,带有2个单独的明暗房间。明亮的房间由透明的有机玻璃制成。在暗室的底部是一个铜栅,可承载36V的电流。在明亮和黑暗的房间之间有一个3厘米直径的孔。反射盒通过电缆连接到微型计算机。计算机控制着动物通过一个洞进入明亮的房间的记录。在黑暗的房间里潜伏期。在实验过程中,将鼠标放在明亮的房间里,其脸部背对孔,同时开始计时。取出鼠标,并记录鼠标从明亮房间到黑暗房间的潜伏时间以及5分钟内的电击次数。这是训练结果。 24小时后测试您的分数。
测量指数:
1、体重
2、器官指数(胸腺,脾脏,肝脏,脑器官指数)
器官指数=器官重量/体重x 100%
3、抗氧化指数
血液:MDA,SOD,MAO
肝脏和大脑:MDA
脑:MAO
注意:
1.选择一只雌性小鼠。由于实验时间长,雄性小鼠成群存活很长一段时间,并且容易咀嚼。它会造成伤害并影响实验结果。
2.注射和给药必须无菌。应当定期更换松鼠笼中的被褥和饮用水瓶,并进行清洁以保持清洁。由于需要花费时间,身体逐渐衰老,其功能状态逐渐恶化。