动物造模,肝炎病毒,血清抗体 中国实验动物信息网 2020-09-25 483

　　目的：建立小鼠肝炎病毒（MHV）血清抗体ELISA检测方法，以对该地区的MHV进行日常监测，以便及时确定SPF小鼠的感染状况。

　　方法：选择三种MHV菌株MHV1、MHV-JHM和MHV-A59，通过L929细胞的增殖和培养获得纯化和浓缩的抗原，并选择合适的包被抗原类型。对BALB/C小鼠进行免疫以获得高滴度的免疫阳性血清；优化ELISA反应系统以建立标准化的ELISA试剂盒，并将其用于检测临床小鼠血清样品。

　　结果：将适合该区域的MHV包被的抗原类型筛选为MHV1、并建立了扩增和浓缩病毒的方法。所制备的MHV抗血清在同一批次中达到多个高滴度水平，可以用作标准化质量控制血清。包被抗原，被测血清和酶复合物的*佳浓度分别为4.0μg/ mL（10-7.73/0.1 mLTCID50），1：40和1：4000稀释度，平均在批内和批间。波动率分别为5.13％和5.57％。检测灵敏度为1：4000稀释度。小鼠仙台病毒（SV），小鼠肺炎病毒（PVM），III型Leovirus（Reo3），小鼠细小病毒（MVM）和小鼠痘病毒（Ect）阳性血清没有交叉反应。稳定性测试的相对偏差小于10％。测试了165个血清样品，阳性血清一致性率为97.37％（37/38），阴性血清一致性率为92.19％（118/127）。

　　结论：本研究建立的ELISA方法在检测小鼠血清中MHV抗体的结果中具有高度特异性，灵敏性和可重复性，可用于该区域小鼠MHV的日常致病性监测。您可以准确确定其感染状态。