动物实验,蛋白激酶-3,甲型流感病毒H1N1 中国实验动物信息网 2020-09-11 541

　　目的：研究受体相互作用蛋白激酶3（RIP3）在甲型流感病毒H1N1感染C57BL/6小鼠后特异性CD8 + T细胞免疫反应中的作用？

　　方法：使用的甲型H1N1PR8流感病毒株是RIP3基因敲除（RIP3-/-）和鼻腔滴注的野生型，分别为组织培养感染剂量的一半（50％组织培养感染剂量，TCID50）为0.7×103、 （WT）C57BL/6只受感染的老鼠？感染后八天（感染后，dpi），分离小鼠脾细胞，并通过荧光激活细胞选择（FACS）：MHC I表位检测流感抗原特异性CD8 + T细胞的数量和功能。肽IV四聚体染色用于对流感特异性CD8 + T细胞染色，细胞内细胞因子染色（ICS）用于通过CD8 + T细胞产生IFN-γγTNF-αγIL-2、检测到的效应细胞因子水平例如。颗粒酶B的表达与CD8 + T细胞的杀伤功能有关吗？

　　结果：0.7×103 TCID50流感病毒感染后，野生型小鼠中流感抗原特异性CD8 + T细胞的比率是小鼠的RIP3/2.71倍；野生型小鼠中CD8 + T细胞是细胞因子IFN-γ吗？ TNF-α？分泌IL-2的能力显着高于RIP3-/-小鼠（P\u003c0.01）；并且WT小鼠中CD8 + T颗粒酶B的表达水平显着高于RIP3-/-小鼠。贵吗（P\u003c0.01）？

　　结论：感染流感A病毒的小鼠的RIP3分子的敲除可导致某些CD8 + T的感染，这是由于流感病毒感染导致细胞数量和功能的下降，RIP3具有流感抗原特异性是否表明它是参与CD8 + T细胞诱导和功能的重要分子之一？