动物造模 中国实验动物信息网 2020-09-08 707

　　简介：我们在氟烷麻醉下对该动物进行药理学表征，作为安全药理学研究的体内实验模型。药物诱导的心血管反应的程度通常小型猪比犬更大，由于其独特的药代动力学曲线，包括药物的有效容积较小和体脂含量低，基底交感神经张力越大，反射越大，介导的增加越大，复极储备较小。我们遇到了一些微小的显示可逆性ST段抬高/抑郁症的病例，在研究期间，偶尔会导致致命性心律失常的发作。由于在相同的麻醉条件下没有观察到这些现象，小型猪和Beagle 犬的冠状动脉调节可能不同。双嘧达莫负荷试验在冠心病诊断中的应用。双嘧达莫的输注抑制细胞内腺苷再摄取，从而增加腺苷的血浆浓度。腺苷然后扩张健康心肌的冠状动脉并增加血液流动。但反过来，血液流入病变的冠状动脉会被"偷走"，导致受损心肌的缺血。双嘧达莫负荷试验不影响健康人ST段的变化，但对冠状动脉病变患者ST段抬高或抑郁有一定的影响。本研究在心电图监测的基础上，用双嘧达莫负荷试验比较和分析健康小型猪和犬之间的冠状循环。

　　双嘧达莫对犬心血管功能的影响：实验采用2只雄性和2只雌性比格犬，体重10.7±0.6公斤。*初用硫喷妥钠（30 mg/kg，IV）麻醉犬。气管导管插管后，通过呼吸器吸入1%含100%氧的氟烷。潮气量和呼吸速率分别设定在20 mL/kg和15次呼吸/min。两组临床上可用的导管鞘，一个被放置到右股动脉，而另一个被设置在右股静脉。为防止血液凝固，肝素钙（100 IU/kg）经导管放置在右股静脉的静脉鞘内。在右股动脉导管鞘的冲洗线上测量血压。双乘积用下列方程计算：双乘积＝收缩压×心率，反映心肌耗氧率。还计算了双乘积与舒张压的比值，以估计心脏供氧与需求之间的平衡（需求/供给比＝双乘积/舒张压）。连续监测心电图导联I、II和III。第II导联用于心电图分析。用Van de Water公式计算QT间期（QTc）：QTC＝QT-0.087×（RR-1000），其中RR间隔的单位为ms. ST段凹陷是在J点后80毫秒和T波的底部测量的。

　　双嘧达莫对小型猪心血管功能的影响：实验采用4只雄性小型猪，体重9.2±0.3公斤。用氯胺酮（16毫克/公斤，I.M）和甲苯噻嗪（1.6毫克/公斤，I.M）预麻醉。将24G插管置入耳廓浅静脉，用1 mg/kg异丙酚注射麻醉。气管导管插管后，通过呼吸器吸入1%含100%氧的氟烷。潮气量和呼吸速率分别设定在10 mL/kg和15次呼吸/min。使用两套导管鞘；一个放置在右股或左股动脉，另一个放置在右股或左股静脉。为了防止血液凝固，肝素钙（100 IU/kg）通过放置在股静脉的导管鞘的冲洗线静脉给药。同犬相同的方式分析心血管变量。

　　监测心率、血压和心电图，并采用实时全自动数据分析系统进行分析。每一次心电图测量都是基于连续记录的三个复合体的平均值。自从氟烷麻醉犬（2只）进行初步实验以来，双嘧达莫在输注0.56 mg/kg超过10min时明显抑制ST段。选择0.056和0.56毫克/公斤的剂量进行这项研究。基础评估后，静脉输注双嘧达莫超10min，剂量为0.056 mg/kg。给药后10, 20和30分钟记录Beagle 犬的每个变量。给药后5, 10, 15、20和30分钟记录小型猪的每个变量。静脉输注双嘧达莫超10min，剂量为0.56 mg/kg。给药后10, 20和30分钟记录Beagle 犬的每个变量。给药后5, 10, 15、20、30、45和60分钟记录小型猪的每个变量。在完成双嘧达莫心血管效应评估后，他们的心脏被切除，以宏观检查冠状动脉的形态。

　　结果：在实验期间犬或小型猪没有观察到心血动力学崩溃或致死性室性心律失常。无论是左冠状动脉前降支、左冠状动脉或右冠状动脉，均未检出冠状动脉狭窄。值得注意的是，Beagle 犬比小型猪有更多更大的心外膜冠状动脉和侧支网络。

　　心率、血压、双乘积和供需比对心率、血压的影响：犬和小型猪心率、收缩压、舒张压、双乘积和供需比变化的时间过程见图。Beagle 犬的药物前控制值（C）分别为119±3次/分钟，139±12/99±9毫米汞柱，16592±1552毫米汞柱 ·次/分钟，169±9。而小型猪则分别为87±5次/分钟， 84±6和58±6毫米汞柱，7255±677毫米汞柱 ·次/分钟和126±9。Beagle犬和小型猪的药物前控制值在我们以前研究的范围内，每个值小型猪均比犬小。犬双嘧达莫低剂量0.056毫克/公斤输注没有改变这些变量中的任何一个。高剂量0.56 mg/kg可使收缩压降低10～20分钟，舒张压10～30分钟，双乘积10～20分钟。而在心率或需求/供给比中没有发现显著变化。另一方面，小型猪，低剂量和高剂量分别降低收缩压和舒张压，双乘积分别为5～30分钟和5～60分钟，而心率或需求/供给率没有观察到显著变化。两种动物在大剂量后10分钟内观察到收缩压/舒张压的*大变化（百分比）和药物前控制值的双乘积，犬分别为-12～-16毫米汞柱（-8／-16%）和-1867毫米汞柱·次分钟（-11%），-25～-20毫米汞柱。小型猪分别为-25～-20毫米汞柱（-31／-34%）和-2903毫米汞柱·次分钟（-40%）。

　　心电图变量的影响：分别总结了Beagle 犬和小型猪的PR间期、QRS宽度、QT间期和QTc的时间变化过程。犬的药物前控制值（C）分别为97±6, 66±8, 271±11和314±10 ms，而小型猪的药物控制值分别为114±3, 92±3, 374±7和400±8 ms。Beagle犬和小型猪的药物前控制值在我们以前研究的范围内。小型猪比Beagle 犬长，但PR间期没有发现显著差异。低剂量使犬QTC延长10～20分钟，而其他变量没有显著变化。高剂量延长QT间期和QTc为10～30分钟，而其他变量无显著变化。小型猪，低剂量和高剂量分别延长PR间隔20～30分钟和5～60分钟，而在其他变量中没有发现显著变化。

　　ST段的影响：犬，4条中有2条显示了ST段的下坡形态，而另外两个在基础对照上分别显示向上或水平。低剂量几乎不改变ST段水平，而高剂量使其明显降低10～30分钟。同时，在小型猪中，4个中有3个显示了ST段的水平形态。而另一个则向下倾斜。低或高剂量并没有显著改变ST段水平。小型猪的其他肢体导联也未观察到ST段压低。

　　结论：双嘧达莫应力试验显示，在小型猪中，ST段没有被压低，提示双嘧达莫对冠状动脉的解剖结构和功能调节具有良好的抗毁性和相似性。同时，双嘧达莫抑制正常犬的ST段，与小型猪不同。提示犬冠状动脉侧支循环发育良好可能在心肌缺血发病中起一定作用。