动物实验,腹膜内压力（IAP） 中国实验动物信息网 2020-09-02 615

　　背景：腹膜内压力（IAP）高于12 mmHg被认为是一种病理性增加，称为腹内高压（IAH）。胰腺炎，外伤，毛细血管渗漏，短暂性填塞和内脏水肿引起的腹腔内压力升高可导致腹腔综合征（ACS）。早期研究表明，IAH可以增加肾静脉压力，增加肾实质压力，降低肾血流量和肾小球滤过率，并引起少尿或无尿。肾缺血和肾实质压迫可激活肾素-血管紧张素类固醇系统，进而引起体液和钠retention留。这种作用进一步增加了血管阻力，并可能导致恶性循环。先前的研究表明，腹腔内压力升高会导致阻塞性和非阻塞性肾盂排泄障碍。 IAH的治疗包括手术和非手术方法，但是*佳手术方案尚未确定。气密性负压密封引流术（VSD）是目前*常用的临时腹部密封策略。腹膜内扩张（IAVI）是一种改良的IAH技术；还需要对腹部手术对肾功能的影响进行其他测试，包括比较手术前后组织变化的影像学检查。本研究通过不完全阻塞门静脉并诱导IAH，改善IAH对失血性休克和复苏后肾脏的作用，并建立IAV的临床成功率，建立了大型动物IAH模型。研究了治疗作用。

　　方法：动物：12个健康的小群体，平均体重22.9±1.7公斤。建立

　　失血性休克和复苏的IAH模型：术前禁食动物12小时，术前放水，氯胺酮（7.2 mg/h/kg）和3％戊巴比妥钠（6 mg）麻醉动物。将实验动物放在长凳上，并对皮肤消毒。插入气管并通过连接到纯氧的呼吸麻醉机维持麻醉。分离右股动脉和静脉，并插入单个内腔导管。多功能传感器和监视器通过茶水管连接。右股动脉插管导致出血，静脉插管用于下腔静脉注射和压力感测。打开腹部后，进行膀胱瘘。分离门静脉，并使用坚固的塑料管（外径5 mm）和丝线结扎血管。移除刚性塑料管，并创建完全门静脉阻塞的模型，以模拟严重肝损伤中肝周堆积过程。主动脉出血直至平均动脉压（MAP）达到50 mmHg，血液被储存在血袋中。腹部切口用分层缝合线封闭。休克一小时后，所有流失的血液都用林格氏液（两倍的血液）返回人体。连续给予林格氏液直至复苏。如果IAP≥12 mmHg IAP维持1小时，则认为IAH模型已成功建立。该模型已成功建立，但四人死于失血性休克。动物分组和阶段观察：4只死亡的动物被排除在研究之外。通过扔硬币，将剩余的八个分为IAVI组（n = 4）和假手术组（n = 4）。 IAVI治疗的程序如下：移除腹部切口和缝合线，将切口从剑突延伸至耻骨联合，松开并移除门静脉结扎，并移除上肠网。将聚乙烯醇明胶海绵放在约30 x 20厘米的网上，并缝合至腹壁。从切口的一侧拉出引流管，然后将其插入海绵中。使用具有良好透气性和良好透气性的生物渗透膜覆盖切口和海绵，直到切口闭合。通过使用流量管连续抽吸动物直至杀死动物，可维持60 mm Hg至80 mm Hg的负压。在假手术组中，切开并缝合腹部切口，该切口从剑突延伸至耻骨联合。松开并去除门结扎和分层缝合线，并直接闭合切口。在撞击之前，在IAH后2小时和手术后22小时开始测量。通过静脉内注射0.2g氯胺酮和10ml 10％氯化钾处死动物。

　　肾功能指数测量：获取每小时尿液量（UV）读数。使用休克前，IAH后2小时和手术后22小时从下腔静脉导管获得的血液样本测量肌酐和尿素氮水平。

　　测量影响肾功能的指标：休克前，IAH后2小时，手术后22小时和26小时，测量以下指标：（1）膀胱灌注压力（IVP）：排空膀胱并向膀胱和硅胶管中注入50毫升盐水。直立。当降至稳定水平时，耻骨联合上方水柱的垂直高度为膀胱灌注压力。 （2）下腔静脉压力（CVP）：使用多功能监视器通过下腔静脉导管测量下腔静脉压力。 （3）彩色多普勒：基于从右肾获得的数据，测量肾皮质的厚度以观察肾盂和杯是否分离。 （4）扩大的CT扫描：测量腹部的前后直径之比（在左肾静脉水平，去除皮下脂肪）。根据从右肾获得的数据，测量肾脏*宽部分的厚度和肾盂的长度。 （5）肾脏组织的干/湿比：收集左肾组织的上部1/8，收集并称重肾脏样品，然后将其放在60°C的干燥箱中放置3天。湿/干比为4至4.5及以上表明严重的器官水肿。 6）肾脏组织病理学：取右肾上部1/8，用10％福尔马林固定，包埋在石蜡中，切片，HE染色并用光学显微镜观察。

　　结果：IAH模型：平均重量为22.90±1.70 kg，MAP基线值为118±14.30 mmHg。出血直至MAP达到50 mmHg；出血量为648±98 ml。 IVP基线为6.65±0.50 mmHg。当IVP为3.20±0.60h时，21.16±？如果达到4.63 mmHg，则所需的护林员液体量为76±3 ml/kg /小时。两只猪出现了直肠脱垂和压力性尿失禁。

　　12头猪中有8头建立了IAH模型（66％）。在IAVI组中，观察期有4头猪存活。在假手术组中，在IAH发作18和20小时后，每4头猪中有2头死于呼吸衰竭。 IAH发作后2小时的紫外线显着低于电击前（55±11 ml/hvs.156±35 ml/h，P\u003c0.01）。在IAVI组中，尿量恢复正常（120±23 ml/h和55±11 ml/h，p\u003c0.01），但未达到正常水平。假手术组的尿量显着低于IAVI组。 IAH开始后两个小时，血液中的Cr和UR水平升高，但无明显差异。 IAVI治疗后，CR和UR持续缓慢增加，假手术组的CR和Ur明显高于其他组。假手术组肾脏组织的干重比明显高于IAVI组。

　　影响肾功能的相关因素：IAH后2小时，静脉肾盂造影和下腔静脉压力明显高于休克前。 22 IAVI治疗后，IVP和下腔静脉压力显着降低，均略高于休克前，但无显着差异。假手术组下腔静脉压力和IVP明显高于IAVI组。

　　图像变化：在计算前后直径与水平直径的比率时，IAH开始后2小时的比率显着高于基线值。右肾肾脏高度的CT检查显示，IAVI组和假手术组之间无显着差异。右肾皮质的厚度通过B超测量，在IAVI治疗组和假手术组之间没有显着差异。通过CT测量右肾窦的直径。 IAH没有重大变化。所有动物的任何方面均无肾积水或肾盂和尿路分离。病理学结果：假手术组肾脏组织中明显的充血和炎性细胞浸润。 IAVI组轻度或无充血，轻度炎症细胞浸润。

　　结论：腹腔室综合征通常发生在危重病人中，并可能影响各种器官系统。肾脏是*常见的器官。观察IAVI引起的IAP减少与肾功能改善之间的相关性。 IAVI可帮助控制IAH后的肾功能不全并降低腹腔内压力，从而减少肾水肿和充血。