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【动物造模-药效评价】-用兔脑粉浸液复制弥散性血管内凝血模型

  (1)复制方法  兔脑粉浸液制备:将兔放血处死,取出兔脑,去净附着的血管和脑膜,冲洗干净后用纱布吸干,置研钵中加入丙酮,将脑组织研磨压碎,每次研磨5min左右,将丙酮倒净,反复更换丙酮,研磨6~7次以除去水分及脂肪,至脑质被捣成灰白色颗粒为止,最后将颗粒平铺在滤纸上,置37℃温箱中0.5h,待丙酮蒸发,脑组织呈粉末状后置小试管内,封口,储存于-20℃备用。造模方法:取2.5~3.0kg实验兔,麻醉后仰卧位固定,颈部手术区常规消毒并去毛,手术逐层分离组织,作颈动脉插管。从颈动脉插管放血4.5ml至盛有3.8%枸橼酸钠溶液0.5ml的离心管内,立即混匀。从耳缘静脉补充灭菌生理盐水5~10ml,经静脉注入2%的兔脑粉浸液(3ml/kg),注入速度控制在2ml/min左右。兔脑浸液注射后20min,打开颈动脉夹,进行第二次放血。将前后两次所得血液以3000r/min离心5min,分离血浆作纤维蛋白原定量、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶原时间(PT)的测定及做血浆鱼精蛋白副凝固实验(3P)。

  (2)模型特点  兔脑浸液注射20min后,模型动物与正常对照动物相比各指标有显著性差异。纤维蛋白原含量较注射前明显降低。反映内源性凝血系统活性的血浆的白陶土部分凝血活酶时间延长,反映外源性凝血系统活动情况的血浆凝血酶原时间延长;测定血浆中纤维蛋白单体可溶性复合物的指标——血浆鱼精蛋白副凝固实验,注射前呈阴性,注射后呈阳性。此外,DIC时血小板计数亦明显降低。

  (3)比较医学  将复制兔DIC模型获得的资料和结果和人类疾病表现进行比较、分析,可用于阐明DIC的发生机理,揭示疾病发生发展规律,为临床疾病诊断和治疗提供理论依据。

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