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【动物实验】-谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

  目的:探讨谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞(MSC)移植在肠缺血再灌注损伤中的作用。

  方法:在移植前体外复苏和培养脐带血间充质干细胞,并观察CM-DiI荧光标记后脐带血间充质干细胞的位置。将80只SD大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注损伤组,谷氨酰胺组,MSC移植组和组合组,每组15只。对照组接受生理盐水灌肠,损伤组接受TNBS(S乙醇稀释)灌肠,TNBS建模后1小时,谷氨酰胺组尾静脉接受0.45 g/kg谷氨酰胺,MSC移植组在尾静脉中一次接受1010/L脐带血间充质干细胞悬液,联合组在尾静脉中给予0.45 g/kg谷氨酰胺+脐带血间充质干细胞悬液1x1010/L。做到了。 ELISA法检测各组大鼠血清中肠脂肪酸结合蛋白(IFABP),白细胞介素6(IL-6)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。谷氨酰胺联合MSC,RT联合移植后,大鼠肠黏膜上皮细胞中caspase-3、NF-kB,Bcl-2 mRNA和蛋白表达在灌流1和3 h后被检测到-通过PCR和蛋白质印迹观察。

  结果:通过荧光示踪观察到移植的MSC细胞在肠粘膜淋巴样组织和腺上皮细胞之间分布,并且MSC可能参与了肠缺血-再灌注损伤的修复过程它具有一定的性质。比较各组大鼠血清SOD,IFABP和IL-6水平的变化。与谷氨酰胺组,MSC移植组和联合治疗组相比,受伤组的血清IFABP和IL-6水平显着高于对照组。 SOD含量明显低于对照组,但谷氨酰胺组,MSCs移植组和联合组均明显高于联合组。显然(P0.05)。与对照组相比,损伤组肠黏膜上皮细胞中Caspase-3和NF-kB的mRNA和蛋白表达显着上调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达显着下调。 (P0.05),但将两组与联合组进行比较。差异是显着的(P\u003c0.05)。

  结论:谷氨酰胺组和MSC移植后,大鼠肠缺血-再灌注损伤程度明显降低。它可能通过抑制caspase 3和NF-kB的表达并促进Bcl-2的表达来减少肠粘膜缺血和再灌注。

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