动物造模,药效评价,肠粘连 z-bio 2024-08-26 77

　　(1)复制方法  成年大鼠，禁食不禁水12～16h，用戊巴比妥钠按40mg/kg体重的剂量腹腔注射麻醉后，将大鼠仰卧固定于手术板上，腹部常规脱毛并消毒皮肤，铺无菌纱布，于下腹部正中作长约2～3cm切口，提出盲肠，置于干纱布上5min，使盲肠浆膜干燥，然后以解剖刀片轻刮整个盲肠浆膜10遍左右，致使整个盲肠壁出现点状轻度渗血，再滴入适量(1～2滴)无水乙醇于创面上。盲肠回纳腹腔原位后，以止血钳连皮肤一起以切口为中心夹伤两侧相应腹壁，用4号丝线在两侧腹壁对称结扎(跨度为0.5cm)，造成局部缺血，分两层以1-0丝线缝合切口。动物术后分笼饲养，第7日处死。按以下标准对粘连程度进行评分：①完全无粘连：0分。②内脏间或内脏与腹壁间只有1条粘连带：1分。③内脏间或内脏与腹壁间有2条粘连带：2分。④多于2条粘连带：3分。⑤内脏直接粘连至腹壁：4分。

　　(2)模型特点  采用本方法建立的动物模型粘连率约为90％，以盲肠和切口为中心可形成多条粘连带，盲肠与小肠、小肠与切口、小肠之间均可形成粘连，评价粘连程度时不用剥离浆膜，不易出血。本模型制备方法简便、经济，模型成功率高，与临床上人类肠粘连的发生机制、病理变化等均有相似之处；且模型动物死亡率低，粘连程度等级资料容易分级评判。

　　(3)比较医学  肠粘连是临床上最常见的疾病之一，也是临床上导致肠梗阻、不孕、疼痛等术后并发症的主要原因。术后肠粘连至今仍是临床上尚未解决的外科难题。有研究报告指出，曾经历过腹部手术的患者80％～90％可发生术后肠粘连。患者肠粘连的形成机制较为复杂，可能的因素之一是患者腹腔手术时，腹腔受到机械、化学、温度等损伤及刺激后，可引起患者腹膜和浆膜的非特异性炎症，导致损伤部位炎性渗出，由于纤溶系统及吞噬能力的受限，再加上机体内氧自由基和溶菌酶可灭活纤溶酶，使溶纤能力被削弱而发生纤维素沉淀，最终形成粘连。同时缺血也是肠粘连形成的另一个重要因素，由于手术时腹膜或浆膜缝合过于紧密，造成局部缺血，则与之接触的腹膜或浆膜很容易形成血管性粘连。除啮齿类动物肠粘连模型外，兔和犬都可复制肠粘连动物模型，而且比大小鼠更易观察和评价。如用体重约为2.5kg的成年新西兰兔，用戊巴比妥钠40mg/kg体重腹腔注射麻醉后，取腹正中切口入腹，在距回盲部2cm处回肠壁上，以牙科用粗砂轮手工摩擦回肠浆膜至局部渗血，造成回肠浆膜面粗糙，然后分两层以1-0丝线缝合切口，即可建立回肠型肠粘连动物模型。目前，在肠粘连模型制备中手术法仍是制作肠粘连模型最常用的方法，采用手术创伤刺激大鼠腹腔均可造成术后肠粘连，其中以盲肠型动物模型的制备较为理想，方法简单，易于操作，实验条件稳定，可控性好，动物死亡率低，观察指标可分级评定和统计。而回肠型动物模型制作因刺激程度和时间、肠粘连程度不易量化等因素，实用价值不如盲肠型动物模型。