动物造模,药效评价,肝硬化 z-bio 2024-08-22 164

　　(1)复制方法  成年狒狒，喂饲Liebert-Decarh乙醇液体饲料，该饲料配方组成为：酪蛋白18.6％，L-胱胺酸0.23％，DL-蛋氨酸0.14％，玉米油2.3％，橄榄油7.7％，亚油酸、亚油酸乙酯0.72％，糊精和麦芽糖等糖70.3％(其中糖的热量50％由乙醇代替)，连续24个月。造模结束后摘取肝脏作组织形态学检查。

　　(2)模型特点  模型动物肝脏出现脂肪浸染、间质炎和纤维样变化，1/3动物出现明显的肝硬化。

　　(3)比较医学  人类肝硬化的病因之一就是长期过量饮酒。乙醇自胃肠道被吸收后进入肝脏，在乙醇脱氢酶及微粒体氧化系统作用下，氧化为乙酸。在此过程中，辅酶A(NAD)转化为还原型辅酶A(NADH)，NAD/NADH比值下降使肝内三羧酸循环受抑、糖异生作用减弱、脂肪酸氧化减少、合成增加，当脂肪酸和三酰甘油增多超过肝脏的处理能力时，其在肝内蓄积导致肝组织脂肪浸染，发生间质炎和纤维样改变，进而诱发肝硬化。本模型的建立和成功复制验证了长期过量饮酒确实能够诱发肝硬化，并提示上述机制的存在是导致肝硬化发生的一种可能途径。本模型符合人类酒精性肝硬变病理特征，但实验动物昂贵，复制周期长而管理难，严重限制了该方法的推广和使用。在此之前，由于单纯喂饲酒精食料难以复制大鼠肝硬化模型，所以有人认为乙醇诱导肝硬化只能在伴有营养缺乏并达到一定程度时才可能发生。况且，乙醇本身能增加机体对胆碱的需求量，而胆碱缺乏能导致肝硬化。所以，酒精性肝硬化模型的建立往往采用多因素协同的方法进行复制，如乙醇与CCl4联合应用造模。乙醇能诱导P450活性从而增加CCl4的肝毒性，在乙醇的致肝脂肪变作用下使用CCl4能加速肝细胞坏死，使造模时间明显缩短，可同时减少两者剂量以降低药物副反应与动物的不耐受现象。有报道小鼠使用该方法60d即可致肝硬化，该方法具有肝硬化稳定、分期明显、动物死亡率低等特点。如采用高脂低蛋白食物与乙醇和CCl4造模，以玉米面为饲料，加20％的猪油和少许胆固醇，用30％的酒精为惟一饮料，每隔3d皮下注射40％CCl4油剂3～5ml/kg体重，6周后即可形成肝硬化。该方法操作简单，成模率高(100％)且死亡率低(20％)。如苯巴比妥钠与酒精和CCl4联合应用造模，先以含苯巴比妥钠的溶液代替饮用水让动物自由饮用2周，随后皮下注射50％～60％CCl4油溶液，同时以10％～30％乙醇溶液为其惟一饮用水，结果9周后病理检查假小叶形成率达90％以上。