动物实验,蛋白磷酸酶5(PP5) 中国实验动物信息网 2020-08-26 1716

　　目的：利用蛋白磷酸酶5（PP5）基因敲除小鼠探讨PP5在小鼠脂肪代谢中的作用。

　　方法：随机选择6周龄的雄性PP5基因敲除（PP5KO）小鼠和野生型（WT）小鼠，高脂饮食6周后，HE肝染色和小鼠肝结构和脂滴的油红色用O染色染色。使用Western印迹和实时PCR技术积累并检测肝组织中脂质代谢相关基因的表达。同时，我们使用PP5KO和WT小鼠成纤维细胞来观察PP5对体外成脂作用的影响。

　　结果：与WT小鼠相比，高脂饮食后的PP5KO小鼠体重显着降低，肝脂质滴明显减小，脂质滴较小。体外实验显示，PP5KOMEF细胞比WT小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）具有明显更弱的脂肪分化和更小的脂质滴。此外，在PP5KO肝组织中，脂肪细胞分化标记基因CD36、AP2、PPARγ2和Glut4的相对表达显着降低，并且糖皮质激素受体（GR）的磷酸化水平增加，能量代谢相关蛋白。它显着升高，并且解偶联蛋白1（UCP1）表达也显着增加。

　　结论：PP5通过调节GR的去磷酸化并影响人体脂肪的分化和能量代谢来调节小鼠的脂肪代谢。