动物造模,药效评价,结核病 z-bio 2024-08-19 167

　　非人灵长类结核病模型是与人类结核病最接近的结核病动物模型，最常用的模型制备方法是利用纤维支气管镜直接将结核菌注入肺右下叶或中叶感染。感染后实验猴的临床检测包括：物理检查，如体重、体温的测量；血液检查，包括血细胞分析、血沉、C反应蛋白等；一系列的肺灌洗液、胃提取物的细菌分离；胸部x线片、CT检查；结核菌素反应。猴血、肺灌洗液、组织中的细胞免疫分析包括：细胞增殖实验、流式、Elispot、T细胞分析、ELISA等。

　　1.经气管内感染模型  用H37Rv经气管内感染猴，在使用极高的菌量(10 000～100 000cfu)情况下，制成急性快速进展、高致死率的多肺叶结核病模型。在使用中等菌量(1000cfu)情况下，制成有临床症状、慢性活动、肉眼可见肺病灶、脑膜炎等结核病模型。在使用低菌量(10～100cfu)情况下，可成为潜伏结核感染模型。

　　2.通过纤维支气管镜直接将结核菌注入猴的肺的右下叶或中叶制备感染模型  这一方法是目前结核菌感染猴模型最常用的模型。感染剂量从十几个cfu至上千个cfu的结核菌，感染用菌株有H37Rv和Erdman株。J.L.Flynn通过纤维支气管镜感染17只猕猴，感染剂量为15～25cfu的H37Rv，所有猴子通过旧结核菌素试验、淋巴细胞增殖试验和PPD来判断感染情况。最终实验猴安乐死后做组织病理检查。感染后4周淋巴细胞增殖实验阳性，6周后结核菌素皮试阳性，8周所有测试均阳性。在某个时间大多数猴子肺灌洗液和胃提取物结核菌分离培养阳性。根据疾病的状况，猕猴被分成3组，1只快速发病的，感染后4周即出现症状，12周被安乐死；9只猕猴为活动组/慢性组，感染后4～6周胸部X线片发现明显的进行性肺部浸润，有临床症状但是进行比较慢；7只猕猴为潜伏感染组，潜伏感染的没有临床症状，仅早期有小的肺部浸润。肺部病理与人相似，所有猴子都有干酪样肉芽肿，主要在右肝门淋巴结，潜伏感染的猴子肉芽肿很少，大部分是纤维化。David M. Lewinsohn用1000 cfu的H37Rv通过纤维支气管镜感染4只恒河猴，通过CT扫描的方法监测了疾病的整个发展过程，所有感染的猴都发展为进行性肺结核，12周即被安乐死。