动物造模,药效评价,人体肿瘤术后转移 z-bio 2024-08-09 221

　　皮下移植瘤转移模型不易建立，主要原因是肿瘤异位植入皮下，其微环境不利于恶性肿瘤生物学特性特别是转移特性的表达，因而人体肿瘤在裸小鼠体内发生转移所需的时间较长，在肿瘤尚未转移或转移不明显时就由于接种部位的肿瘤负荷过大造成动物死亡，使肿瘤的生物学特性在小鼠荷瘤寿命内没有完全地表达出来。也就是说，一般情况下，皮下移植肿瘤的动物最终多数因为皮下瘤过大而衰竭死亡，而并非因为肿瘤转移而死亡。临床上，恶性肿瘤手术治疗的患者5年存活率之所以很低就是因为在根除原发瘤时肿瘤已发生了远处转移或微转移。针对临床上肿瘤根除术后继发远处脏器转移，笔者所在的实验室模拟临床采用手术切除肿瘤的方法建立了裸小鼠人结肠癌术后转移模型，方法是取人结肠腺癌细胞株HCT一116接种于裸小鼠右侧背部近腋部皮下，体内传代后得到皮下移植瘤，4周后待肿瘤出现轻度坏死时，随机挑选15只裸小鼠常规麻醉，手术切除肿瘤组织，其余13只裸小鼠未作处理继续观察。未切瘤裸小鼠9周时肿瘤坏死严重，部分动物出现恶病质，解剖检查肺转移率为23％(3/13)，而且肉眼观察基本正常，仅靠镜检才被发现；切除肿瘤的裸小鼠手术部位无肿瘤复发，动物健康良好，17周后肺转移率达到100％(15/15)，淋巴结转移率100％(15/15)，脾脏转移率33.3％(5/15)。建立术后转移模型的关键一是要将肿瘤切除干净，避免局部复发；二是选择适当的手术切瘤时间，过早切瘤可能转移特性没有充分表达，过迟则瘤体过大并且坏死，手术后易造成创面太大、出血和肿瘤切除不彻底，以至于出现感染、出血、局部复发甚至死亡等情况，影响模型的成功；三是需要实验观察足够长的时间，一般切除肿瘤后10周以上动物方可出现高的转移率。

　　人体肿瘤术后转移动物模型模拟了临床肿瘤根除术后发生远处转移的过程，为研究肿瘤转移机制和术后抗转移治疗提供理想的动物模型。我们发现，除了人结肠腺癌细胞株 HCT-116裸小鼠皮下移植瘤能建立术后转移模型外，非小细胞肺癌H460、低分化胃腺癌MKN-45、黑色素瘤A375等多种人癌细胞系都具有术后转移的特点。按照手术切除肿瘤可以延长荷瘤动物寿命并使肿瘤转移特性充分表达的思路，也可以建立原位移植术后转移动物模型，不仅提高肿瘤的转移率，而且更符合肿瘤患者临床的实际情况。例如人肝癌原位移植于裸小鼠体内后，适当的时候切除荷瘤的部分肝叶，一段时间后可能出现肺和淋巴结的转移；人肾癌原位移植于裸小鼠体内，待肿瘤生长后切除荷瘤的一侧肾脏，数周后裸小鼠可能出现远隔脏器的转移；人癌细胞接种于裸小鼠爪垫内侧，肿瘤生长一段时间后将荷瘤下肢切除，可提高淋巴结和肺的转移率。