动物造模,药效评价,骨质疏松 z-bio 2024-08-02 120

　　【造模机制】原发性骨质疏松包括绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松，主要表现为骨量减少，骨微观结构退变，骨强度下降而脆性增加，易于发生骨折。其发病机制复杂，诸多因素影响其发病过程，内分泌功能紊乱是其确定发病因素之一。切除双侧卵巢(去势模型)的大鼠体内雌激素分泌水平下降，其对破骨细胞的抑制减弱，破骨细胞功能活跃，成骨细胞的功能代偿性增强，但总趋势是骨吸收大于骨形成，骨骼呈高转换状态。该模型引起的骨质疏松与人类女性绝经后骨丢失相近。

　　【造模方法】选用3～10月龄的健康雌性300～400g Sprague Dawley大鼠，实验室常规喂养1周。2％戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉，取俯卧位或仰卧位，术区剃毛，碘酒乙醇消毒。手术入路有两种：一是背侧入路，在大鼠髂嵴顶部外上方1cm左右，腰椎骶棘肌两侧做纵向切口长约0.8cm，打开后腹膜，切除双侧卵巢；二为腹侧入路，取下腹部正中切口长约1.5cm，开打腹腔，显露卵巢，提起后丝线结扎其蒂部，将其切除，然后再切另一侧卵巢。卵巢为深粉红色颗粒状组织，多被其周围脂肪组织所掩盖，术中需拨开这些组织，方能将其显露。对照组手术方法与实验组相同，但打开腹腔后不切除卵巢。术后正常饮食，12周即可建立骨质疏松模型。

　　【模型特点】术后8～12周即可成功造模，表现为股骨和全身的骨密度降低，骨陷窝间隙增大，骨细胞减少，破骨细胞增多，骨小梁体积降低，厚度下降，数量减少，小梁骨彼此分离；股骨骨皮质变薄，进行性的股骨、胫骨抗弯强度降低及脆性增加。

　　【模型评估和应用】去卵巢大鼠是美国食品与药物管理局(FDA)和世界卫生组织(WHO)推荐的研究绝经后骨质疏松症模型，它正确地模拟了成年妇女激素缺乏的临床特性及对激素替代疗法的反应，大鼠松质骨的骨质疏松进程，对研究骨骼的生理学反应非常有利。未交配的6～10月龄雌性大鼠是预防研究的最佳选择。而10～11月龄雌性大鼠对研究峰值骨量以后的骨丢失有重要价值。如果实验的目的是研究成年人骨病进程的特点，10月龄的雌性大鼠被切除卵巢造成的骨丢失是首选的动物模型，此时它已达骨峰值，且同成人女性骨质疏松有极相似的临床表现。另外，由于体重与骨密度成正相关，雌激素水平下降可引起体重上升。体重增加时骨密度增高可以部分抵消雌激素缺乏引起的骨丢失，所以实验中应适当控制动物的体重。

　　模型检测的方法有血清生化标志物检测、骨组织形态计量学和骨密度测量等。大鼠没有脆性骨折发生，但通过对大鼠骨的生物力学实验能正确地评价骨的脆性。理论上说，对骨质疏松模型的评价方法越多越好，但由于经济因素、技术设备、实验动物数量等条件的限制，各种指标不可能全部测量。模型中一般选择包括骨密度在内的至少两种(以上)技术指标进行综合评估。