动物造模,药效评价,诱发性肝癌 z-bio 2024-08-02 65

　　【造模机制】诱发性肝癌动物模型是指用化学、物理及生物致癌因素作用于实验动物，模拟肝损伤-纤维化-恶性转化的周期变化，诱发动物形成的肝癌。目前以化学诱癌剂诱发为主，常用致肝癌的物质有二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)、对二甲基氨基偶氮苯(dimethylaminoazobenzene, DBA)、2-乙酸氨基酸(2-acetylamino fluorine,2-AAF)、亚氨基偶氮甲苯(o-aminoazotolueue,OAT)和黄曲霉素(aflatoxin,AF)。

　　【造模方法】

　　DEN诱导模型：单用时可给予Sprague Dawley大鼠或Wistar大鼠0.25％DEN水溶液按10mg/kg剂量灌胃，每周一次，同时每天以0.025％DEN水溶液供动物饮用，连续喂养6个月。或给予一次性腹腔注射0.5％DEN的无菌水溶液(100mg/kg)，1周后开始持续供给100mg/L的DEN无菌水溶液自由饮用直至16周；其间第9～11周改供给无菌水。DEN亦可联用2-AAF即Solt-Farber诱癌法：一次性给予大鼠腹腔注射200mg/kg DEN溶液，2周后喂养含0.02％2-AAF饲料14天，第3周行大部分肝切除，第4周恢复普通饲料喂养。

　　DBA诱导模型：即用含0.06％DAB饲料喂养，并控制维生素B2含量(≤1.5～2.0mg/kg)，连续喂养4～6个月。

　　2-AAF诱导模型：含有0.05％2-AAF饲料喂养 Sprague Dawley大鼠。连续3～4个月。

　　OAT诱导模型：用含1％OAT溶液(10mg/ml)涂在小鼠的两肩胛间皮肤上，隔日1次，每次2～3滴，连续7～8周。

　　AF诱导模型：大鼠肝癌每月饲料中含0.001～0.015ppm喂6个月。或用二甲基亚砜(DMSO)溶解AF，按每天400μg/kg腹腔注射1次，连续2周后停止注射，一次性再注射0.75～1.50mg/kg的AF，2周后行肝大部分切除术。

　　【模型特点】DEN为最常见的化学诱癌剂，诱发大鼠致癌率为80％。DBA法6个月即可发生肝癌，诱癌率为60％。2-AAF诱导3周即可出现癌前病变，镜下见肝细胞呈卵圆形细胞增生，且具大小不等的癌巢结节，3～4个月后有80％～90％动物产生肝肿瘤。OAT涂抹法给药后8周即出现结节，7个月后即诱发小鼠肝癌，诱癌率为50％左右。AF诱发大鼠肝癌发生率为80％，但病程较长，肿瘤多为弥漫结节型。

　　【模型评估和应用】诱发性模型起病隐匿、诱导周期长。诱导过程中动物的死亡率较高，肝癌发生的部位、病灶数及时间等个体差异也较大。目前，该模型多用于肝癌病因学、遗传学及生物学等方面的研究。