动物造模,药效评价,SLE小鼠 z-bio 2024-08-01 1506

　　【造模机制】以活化的近交系小鼠淋巴细胞作为抗原免疫同系小鼠，可诱导宿主产生自身抗 dsDNA抗体、抗核抗体等，抗原抗体复合物沉积于肾组织，引起免疫复合物性肾小球肾炎，类似于人类的狼疮肾炎。

　　【造模方法】无菌取脾脏和肠系膜淋巴结，制备淋巴细胞，用1640培养液调整细胞浓度为2×1000000个/ml，分3组，每组分别加刀豆蛋白A(ConA，终浓度10μg/ml)、脂多糖(LPs，终浓度10μg/ml)、IL-2(终浓度1000U/ml)，于37℃、5％CO2培养72小时，按2×10000000细胞/只皮下注射，1次/周，计3次。

　　活性细胞核及其染色质从ConA活化的脾细胞中提取，静止细胞核及其染色质从未活化的脾细胞中提取。分别按2×10000000个核/只、50μg染色质，只皮下注射，每1次，周，计3次。末次免疫后眼眶后静脉丛采血样，并分离血清。检测IgG类抗 dsDNA抗体生成。取小鼠肾脏做冷冻切片，用直接免疫荧光法检测肾小球IgG类免疫复合物沉积。

　　【模型特点】经ConA激活的T淋巴细胞、经 LPS激活的B淋巴细胞及经IL-2活化的LAK细胞免疫的小鼠均检测到高滴度IgG类抗dsDNA抗体生成。经活性细胞核免疫的小鼠及经活性染色质免疫的小鼠均检测到IgG类抗dsDNA抗体生成。静止细胞核免疫和静止染色质免疫的小鼠则不出现IgG类抗dsDNA抗体。

　　对IgG类抗dsDNA抗体阳性的小鼠，用直接免疫荧光法可以检测到小鼠肾脏有IgG类免疫复合物沉积，呈斑块状。IgG类抗dsDNA抗体阴性的小鼠则未见有肾内IgG类免疫复合物沉积。

　　【模型评估和应用】此模型可用于SLE病因、发病机制、自身免疫性疾病的免疫调节、免疫复合物性肾炎以及治疗SLE药物的药效学研究等。