动物造模,药效评价,鼻咽癌转移 z-bio 2024-07-31 108

　　针对鼻咽癌易出现淋巴结、肝、肺、骨转移的情况，建立鼻咽癌转移动物模型是鼻咽癌研究的重要途径之一。

　　【造模机制】利用动物体内传代的方法，筛选出具有高转移性的鼻咽癌转移瘤细胞亚株，接种于裸小鼠或家兔皮下或鼻咽部，观察鼻咽癌瘤细胞的转移特性。

　　【造模方法】

　　1．裸小鼠淋巴结转移动物模型  筛选鼻咽癌细胞株(如5-8F-EGFP)，5％CO2，37℃饱和湿度下，常规培养于10％FCS-RPMI1640培养基中，细胞密度达到80％时，用0.25％胰酶消化，显微镜下计数，制成1×10000000/ml细胞悬液。选6～8周裸小鼠，尾根部皮下(或免疫功能低下部位)注射0.1ml。每天观察肿瘤生长情况。待裸鼠出现恶病质时处死动物，在整体成像系统取淋巴结转移灶原代培养，接种裸小鼠，重复筛选3次后获得淋巴结转移潜能的鼻咽癌细胞株(如5-8F-LN)，将其悬液裸鼠爪垫接种0.1ml，20天后可见到裸鼠腘窝可扪及转移性结节。将筛选得到的细胞悬液(5-8-LN)采用原位注射的方式接种给裸鼠，可建立鼻咽癌原位接种模型，可视化观察原位肿瘤的生长情况以及血管生成和转移。

　　2．兔鼻咽移植癌模型  将VX2瘤细胞株荷瘤兔麻醉，将肿瘤从兔的荷瘤部位剥离，生理盐水冲洗，剔除坏死组织后剪碎，匀浆器匀浆，生理盐水稀释成1×10000000/ml细胞悬液，注射0.2ml细胞悬液于兔后腿腹股沟皮下，制成传代兔，2周左右可形成实质性包块，肿瘤长至直径2cm可继续传代。选2～4月龄新西兰兔，雌雄均可，将兔麻醉后仰卧，张口固定，穿刺针穿过软腭进入鼻咽部，CT扫描观察进针位置，满意后注入瘤细胞悬液0.4ml，3～4周后可发现鼻咽部肿物，并可发生多部位的瘤细胞转移。

　　【模型特点】

　　1．裸小鼠淋巴结转移动物模型  利用免疫缺陷动物体内传代的方法，筛选出不同器官亲和性的瘤细胞亚株，通过观察转移的特异性和相关影响因素探讨肿瘤转移的机制。还可利用转染技术将稳定表达荧光素酶的肿瘤细胞原位或异位移植到裸鼠，通过活体荧光成像技术可视化观察鼻咽癌瘤细胞的生长、发展和转移过程。

　　2．兔鼻咽癌转移模型  此模型肿瘤形成后向周围迅速浸润性生长，颈部淋巴结转移率高(93.3％)，晚期可出现肺转移，与人鼻咽癌的生长过程类似。啮齿类动物鼻咽癌模型由于动物体积小，鼻咽部更小，不适合进行影像学检查来观察细微的结构变化。家兔体型相对较大，可以在CT、MRI、 PET-CT影像学检查中明显、清晰地显示所关注的鼻咽结构、鼻咽肿物以及周围组织的关系等。

　　【模型评估和应用】肿瘤转移是恶性肿瘤最重要的生物学特性之一，研究肿瘤转移机制和抗肿瘤研究都必须建立相应的人类肿瘤动物转移模型。两种鼻咽癌转移模型均有转移率高、相对淋巴结转移靶向性较强的特点，所选用瘤细胞株生物学特性稳定，建模过程也相对简单易行。家兔转移模型是一种肿瘤细胞生长特性与人鼻咽癌生长特性相

　　似又可以方便进行相关影像学检查的模型，对于研究鼻咽癌转移机制和鼻咽癌防治的探索是非常方便的手段。可视化鼻咽癌转移模型对进行鼻咽癌治疗的放化疗分割、药物筛选等研究都具有重要意义。