动物造模,药效评价,甲型肝炎 z-bio 2024-07-30 129

　　【操作步骤】取甲肝病人甲肝抗原阳性大便，制成5％悬液，并依次以3000及8000转/分各离心30min，上清液冻存于－80℃备用。成年健康树鼩，在ABSL-3实验室内，每只口服5％甲肝病人甲肝抗原阳性新鲜大便悬液0.5ml。感染后持续排毒15～21d，滴度为1：10～1：320，30d后，排毒停止。用第1代感染树鼩甲肝抗原阳性粪便的10％悬液给每只正常树鼩口服1ml进行第2代感染；感染后约1周仍能在其粪便中查到抗原，排毒持续12～27d，其高峰在7～13d；将第2代感染动物排毒高峰期粪便制成10％悬液，以同法进行第3代感染，后者粪便中也能查到抗原。

　　【结果分析】(1)甲肝病毒可在树鼩体内繁殖，感染后7～13d开始从粪便排毒；持续15～21d，随着病毒在树鼩体内传代，潜伏期似有缩短，感染率也趋于增高；然而，多数动物为非临床型，第1代感染动物仅个别有一过性血清谷丙转氨酶(SGPT)升高，似与病毒的适应性有关。(2)感染后2～16周，有78％的动物血清中出现甲肝病毒抗体，然其滴度较低，且有的很快不能再现，对照组的动物，服正常人大便滤液的前后，持续测出较高滴度的甲肝病毒抗体，这可能是自然感染所致，因树鼩有吃人粪的习性。(3)用固相放射免疫阻抑试验及免疫电镜观察病毒颗粒的大小、形状和免疫学性质，均证明从感染树鼩粪便提取的抗原与人的甲肝病毒相似。(4)感染树鼩尸检看到其肝脏充血、水肿及实质变性；但和国内外用甲肝病毒感染狨猴、黑猩猩和红面猴比较，树鼩肝脏病变较轻，没有出现急性肝炎的典型改变，这可能和病毒的感染量、毒力及其在树鼩体内的繁殖程度有关。