动物造模,药效评价,葡萄膜炎 z-bio 2024-07-29 245

　　1．模型制作方法  SD大鼠，二级，6～8周龄，体重150～180g，雄性。所用内毒素为伤寒杆菌内毒素(LPS，Sigma)。将内毒素溶于无菌生理盐水中，使溶液浓度为2g／L，将50μl内毒素分别注射于实验组大鼠的双后足底部，每只鼠的注射总量为100μg；于注射前及注射后第4、6、12、18、24小时进行裂隙灯及眼底镜检查，必要时用托品酰胺散瞳检查，详细记录临床体征的改变。参照并修改Hoekzema等的方法对临床表现进行评价与计分：虹膜充血、前房内渗出、前房积脓、瞳孔缩小各0～2分，总分为8分。正常对照组双后足底部仅注射50μl生理盐水。

　　2．观察指标与分析

　　(1)房水蛋白含量测定：于内毒素注射后24h处死前，将等量氯胺酮与氯丙嗪(各1ml／kg)混合后于鼠腹腔注射全身麻醉，丁卡因滴眼剂局部麻醉。在解剖显微镜下，用29号针头通过透明角膜进行前房穿刺，将每只鼠双眼的房水分别收集，储存于一20℃冰箱内，采用考马斯亮蓝G2250染料法作房水蛋白定量。结果表明，正常组房水蛋白的质量浓度最高值为4.2g／L，最低值0.5g／L，平均值(2.3±1.8)g／L；实验组内毒素注射后24h房水蛋白的质量浓度最高值为24.4g／L，最低值18.3g／L，平均值(21.3±3.0)g／L，二者有显著差异(P<0.001)。

　　(2)眼病理学检查：虹膜血管扩张，虹膜睫状体、前后房及玻璃体腔均有炎症细胞浸润，以多形核中性粒细胞为主，有一定量的淋巴细胞、单核巨噬细胞。角膜背部大量中性粒细胞黏附，虹膜睫状体基质增厚，上皮细胞破坏，失去正常结构，瞳孔闭锁；视网膜显著增厚，大量多形核白细胞浸润，累及视盘，一些部位可见视网膜下浆液性渗出，脉络膜轻度受累，表现为脉络膜水肿及炎症细胞浸润。