动物造模,药效评价,肺损伤 z-bio 2024-07-25 254

　　1.造模材料  动物：成年Wistar大鼠，雄性，体重230～270g；药物：戊巴比妥，生理盐水，肝素，乳酸林格氏液；器械：注射器，手术器械，电热毯，微量输液泵，多导生理记录仪。

　　2.造模方法  术前禁食12h，自由饮水，腹腔注射1％戊巴比妥(40mg/kg)，待动物麻醉后，仰卧位固定于大鼠手术台，并用电热毯保持直肠温(36.0±0.5)℃。暴露右侧颈内动脉并置管(22G动脉穿刺针)，连续监测平均动脉压(MAP)和心率(HR)；暴露右侧股动脉、股静脉并置管，分别用于抽取血液和液体同输；尾静脉穿刺置管。并连接微量输液泵，用于输注药物或生理盐水。所有手术均严格无菌操作，操作完成后，稳定30min。然后，由股动脉缓慢抽取血液2.0ml/(kg·min)，加肝素保存用于回输，继续抽取或回输血液使MAP稳定在5.32kPa左右，60min制成失血性休克模型。复苏时将自体血液全部回输并追加输入乳酸林格氏液，维持MAP在10.64～13.33kPa。对照组动物仅切开暴露颈部、股部血管。

　　3.造模原理  严重的失血性休克可引发急性肺损伤。

　　4.造模后的变化  与对照组比较，造模组复苏后各时点(2、4、8、12h)多形核中性白细胞(polymorphonuclear neutrophils, PMNs)表面CD11b/CD18表达[造模组2h：(50±6)％，4h：(57±9)％，8h：(60±10)％，12h：(47±8)％]；对照组为(23±4)％均升高，肺组织中MPO活性[造模组2h：(1.12±0.08)U/g，4h：(1.76±0.11)U/g，8h：(2.34±0.13)U/g，12h：(2.31±0.12)U/g]；对照组为(0.43±0.04)U/g均升高。

　　光镜下，对照组肺泡大小形态均匀，结构清晰，肺泡腔内无出血和PMNs浸润。造模组肺泡壁破坏严重，血管壁和肺泡间隔明显增厚，并且随复苏时间延长肺损伤加重。电镜下，对照组肺组织超微结构正常。造模组肺组织损伤严重，表现为：Ⅰ型上皮细胞肿胀，间隔消失，Ⅱ型上皮细胞合成分泌表面活性物质减少，内质网脱颗粒，游离核糖体明显减少。